Centrifugeuse préparative

离心机制备

• 批准号: 358954-2008
• 负责人: Salesse, Christian
• 金额: $ 2.45万
• 依托单位: Université Laval
• 依托单位国家: 加拿大
• 项目类别: Research Tools and Instruments - Category 1 (<$150,000)
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 加拿大
• 起止时间: 2007-01-01 至 2008-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://www.nserc-crsng.gc.ca/ase-oro/Details-Detailles_eng.asp?id=363597
• 关键词: Centrifugeuse; pr; parative

Nous sommes intéressés à déterminer la structure et les paramètres responsables de la liaison membranaire de plusieurs protéines impliquées le cycle visuel des rétinoïdes (rétinol déhydrogénase et lécithine rétinol acyl transférase) ainsi que la liaison membranaire de protéines des photorécepteurs visuels (recoverine, calmyrine et RP2). Une centrifugeuse préparative est essentielle pour toutes les étapes de surexpression de ces protéines ainsi que pour la préparation de cellules compétentes et la concentration des échantillons de protéines purifiées. De plus, nous nous intéressons à l'étude des régions régulatrices modulant l'expression des gènes des sous-unités d'intégrines alpha 5, alpha 6 et alpha 9 durant la cicatrisation cornéenne. Une part considérable de ces travaux vise à introduire, par transfection transitoire, des molécules d'ADN recombinant dans des cellules en culture. La production d'un nombre considérable de plasmides portant différents segments, intacts ou mutés, des promoteurs de ces gènes et la préparation d'extraits de protéines nucléaires ainsi que de cellules compétentes requièrent une centrifugeuse préparative. Cependant, notre centrifugeuse préparative a fait récemment défaut et ne peut plus être réparée car les pièces ne sont plus disponibles. En effet, cette centrifugeuse a été fabriquée en 1966 et a donc 41 ans. C'est pour remplacer cet appareil défectueux que nous demandons un soutien financier au CRSNG car les travaux de recherche des étudiants de nos équipes de recherche en dépendent. En effet, leurs travaux sont retardés parce que nous ne disposons plus de cet équipement. Depuis le bris de notre centrifugeuse en mai dernier, les étudiants font la queue pour faire leurs centrifugations. Ils doivent souvent attendre 1-2 jours avant de centrifuger leurs échantillons. Il leur est ainsi très difficile de planifier adéquatement leurs expériences.

我们感兴趣的是确定多个蛋白质的联络膜的结构和相关参数，这些蛋白质包括视色素（去氢维生素A和去氢维生素A酰基酶）的循环，以及视光感受器蛋白质（recoverine、calmyrine和RP 2）的联络膜。一台离心机的制备是必不可少的，用于所有蛋白的超表达，也就是用于完整细胞的制备和纯化蛋白的浓缩。此外，我们还对调节区域进行了研究，调节了α 5、α 6和α 9杜兰特在角膜瘢痕形成期间的基因表达。一个可以考虑的部分是通过转染，将ADN分子重组到培养细胞中。La production d'un numbre considerable de plasmides portant differérents segments，intacts or mutés，des promotionde ces gènes et la preparation d'extraits de Protéines nucléaires ainsi que de cellules compétentes requirerent une centrifugeuse preparative.然而，我们的离心机准备工作是一项非常重要的工作，而且不可能再把这些零件重新准备好。实际上，这台离心机是在1966年制造的，后来又用了41年。这是为了弥补这一缺陷，我们要求Au CRSNG为我们的研究设备的学生的研究工作提供支持。实际上，我们的工作并不迟缓，因为我们没有配备这些设备。在我们的离心机上，学生们排着队等着我们的离心机。他们在离心机前的1-2天会去那里。这是一个很难把你的经验变平的问题。