Système DeltaPi-4 d'adsorption de protéines

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Les films monomoléculaires de Langmuir sont très utiles comme modèles membranaires pour déterminer l'affinité de diverses protéines pour des lipides. On obtient cette information en déterminant la pression maximale d'insertion (PMI) de protéines dans un film monomoléculaire. La méthode consiste à étaler une quantité suffisante de lipides à la surface d'un tampon (sous-phase) contenue dans un petit bain de monocouche pour atteindre une pression de surface initiale. L'injection subséquente d'une protéine dans la sous-phase résulte en une cinétique d'adsorption pour atteindre l'équilibre en 6 heures au minimum. Pour déterminer une valeur de PMI, des mesures à 12-15 pressions de surface initiales différentes sont nécessaires, ce qui permet de réduire l'écart type. Il faut ensuite faire des mesures avec des lipides représentatifs de la membrane où se trouve la protéine d'intérêt. Pour les photorécepteurs, il faut procéder à des mesures de PMI avec 12 lipides différents. Par conséquent, la détermination de la PMI d'une seule protéine nécessite 1080 heures d'utilisation de notre seul système de mesure d'adsorption de protéines ou 27 semaines de travail (6 heures au minimum pour la cinétique d'adsorption X 15 pressions de surface initiales X 12 lipides différents). Ce système de mesure est donc utilisé par une seule personne pendant 27 semaines, ce qui retarde énormément le travail des 9 PHQ de mon équipe de recherche dont les travaux visent à mesurer la PMI de 10 protéines différentes. Avec ce seul système, plus de 5 années seront nécessaires pour déterminer la PMI de ces protéines. Pour résoudre ce problème, nous demandons un soutien financier au CRSNG pour acheter un Système DeltaPi-4 d'adsorption de protéines vendu par la compagnie Kibron. Il permet de faire 4 mesures d'adsorption de protéines en même temps. Il est en effet muni de 4 détecteurs de pression de surface et 4 petits bains de monocouche indépendants. Cet appareil permettra donc de réduire de 27 à environ 7 semaines le temps nécessaire pour mesurer la PMI d'une seule protéine, ce qui accélérera énormément le travail des membres de mon équipe de recherche qui pourront ainsi déterminer la PMI de 8 protéines par année au lieu de seulement 2 protéines.