Développement d'un système recombinant de production de la chitosanase thermostable Csn (INNOV-phase 1)

壳聚糖酶耐热 Csn 重组生产系统的开发（INNOV-阶段 1）

• 批准号: 437578-2012
• 负责人: Brzezinski, Ryszard
• 金额: $ 9.06万
• 依托单位: Université de Sherbrooke
• 依托单位国家: 加拿大
• 项目类别: Idea to Innovation
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 加拿大
• 起止时间: 2012-01-01 至 2013-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://www.nserc-crsng.gc.ca/ase-oro/Details-Detailles_eng.asp?id=499054
• 关键词: veloppement; un; syst; me; recombinant

Une chitosanase thermostable a été découverte chez une souche bactérienne nouvellement isolée à partir d'un compost de crevettes, Paenibacillus sp. 1794. Cette enzyme (la Csn1794) permet de contrôler efficacement le poids moléculaire du chitosane, un polysaccharide cationique aux nombreuses applications potentielles dans les domaines biomédicaux, agricoles, environnementaux et cosmétiques. Mais la souche de Paenibacillus native nécessite un milieu de culture très coûteux afin de produire la chitosanase, surtout par le besoin d'ajouter des oligosaccharides de glucosamine comme inducteurs. Afin de rendre beaucoup moins coûteuse la production de la chitosanase Csn1794 il est proposé de développer un système recombinant en utilisant, comme hôte, des bactéries du groupe des actinomycètes. L'industrie biotechnologique est très familière avec les actinomycètes, car ils sont très utilisés en tant que producteurs d'antibiotiques. Le système sera basé sur des gènes synthétiques composés de trois cassettes conçues selon le principe modulaire: la cassette promotrice de la transcription; la cassette incluant les segments d'initiation de la traduction et le peptide signal et la cassette composée de la séquence codante pour la protéine et du segment terminateur de transcription. Le projet propose de contruire et de tester l'efficacité de 90 gènes modulaires, placés soit sur un vecteur plasmidique extrachromosomique soit sur un vecteur intégratif à localisation chromosomique et introduits dans deux souches hôtes différentes. Suite à l'identification de la meilleure combinaison gène/vecteur/hôte, le milieu de culture pour la production de la chitosanase Csn1794 sera optimisé par une approche basée sur un plan d'expériences.

Une chitosanase thermostable a été découverte chez une souche bactérienne nouvellement isolée à partir d'un compost de crevettes，Paenibacillus sp. 1794.该酶（la Csn 1794）可有效控制壳聚糖的分子量，这是一种阳离子多糖，在生物医学、农业、化妆品等领域具有潜在的应用前景。迈斯是一种天然类芽孢杆菌的来源，它可以在一个培养环境中产生壳聚糖酶，除了诱导葡萄糖胺低聚糖外。在放线菌群的细菌中，建议使用一种重组系统来生产壳聚糖酶Csn 1794。生物技术工业与放线菌非常相似，因为它们通常用于生产抗生素。三个基因表达盒组成的系统包括三个模块：转录启动子盒、包含转录起始片段和肽信号的转录盒、蛋白质序列编码和转录终止片段的转录盒。Le projet proposed de contruire et de tester l'efficacité de 90 gènes modulaires，placés soit sur un vecteur plasmidique extrachromosomique soit sur un vecteur intégratif à localisation chromosomique et introduits dans deux souches hôtes différentes.为了确定基因/载体/宿主的最佳组合，通过基于实验计划的方法优化了生产壳聚糖酶Csn 1794的培养环境。