Développement d'un système recombinant de production de la chitosanase thermostable Csn (INNOV-phase 1)

一种壳聚糖酶，可耐热性，一种变性，一种变性，一种变性，一种变性，一种变性，一种变性，一种变性，一种变性。Cette酶（la Csn1794）在生物、农业、环境和宇宙等领域具有应用潜力。Mais la souche de Paenibacillus在自然环境中培养的细菌产生了壳聚糖酶，超过了其他细菌产生的低聚糖-氨基葡萄糖诱导物。在de rendre beaucoup moins co<s:1> teuse la production de la chitosanase Csn1794之后，将测试de d<s:1>开发器系统<e:1>重组物（recombinant en utilitisant）， comme hôte， des bactdu groupe des放线菌<e:1> （groupe des放线菌）。工业生物技术是由放线菌组成的，工业生物技术是由放线菌组成的，工业生物技术是由抗生素组成的。系统<s:1> <s:1> basbasess sur des g<s:1>合成和合成<s:1> <s:1>合成和合成<s:1>合成和合成<s:1>合成和合成磁带；盒式磁带促进转录；La卡带包括起始段、起始段、传导段和肽信号段，La卡带包括起始段、起始段、传导段和肽信号段，La卡带包括起始段、起始段和转录段、终止段和起始段。本项目提出了构建一个有效的测试器，一个有效的检测器，一个有效的检测器，一个有效的检测器，一个有效的检测器，一个有效的检测器，一个有效的检测器。Suite l'identification de la meilleure组合g<e:1> /vecteur/hôte， le milue de culture pour la production de la chitosanase Csn1794 sera optimisise - 1方法basacei sur un plan d' expacei。

Une chitosanase thermostable a été découverte chez une souche bactérienne nouvellement isolée à partir d'un compost de crevettes, Paenibacillus sp. 1794. Cette enzyme (la Csn1794) permet de contrôler efficacement le poids moléculaire du chitosane, un polysaccharide cationique aux nombreuses applications potentielles dans les domaines biomédicaux, agricoles, environnementaux et cosmétiques. Mais la souche de Paenibacillus native nécessite un milieu de culture très coûteux afin de produire la chitosanase, surtout par le besoin d'ajouter des oligosaccharides de glucosamine comme inducteurs. Afin de rendre beaucoup moins coûteuse la production de la chitosanase Csn1794 il est proposé de développer un système recombinant en utilisant, comme hôte, des bactéries du groupe des actinomycètes. L'industrie biotechnologique est très familière avec les actinomycètes, car ils sont très utilisés en tant que producteurs d'antibiotiques. Le système sera basé sur des gènes synthétiques composés de trois cassettes conçues selon le principe modulaire: la cassette promotrice de la transcription; la cassette incluant les segments d'initiation de la traduction et le peptide signal et la cassette composée de la séquence codante pour la protéine et du segment terminateur de transcription. Le projet propose de contruire et de tester l'efficacité de 90 gènes modulaires, placés soit sur un vecteur plasmidique extrachromosomique soit sur un vecteur intégratif à localisation chromosomique et introduits dans deux souches hôtes différentes. Suite à l'identification de la meilleure combinaison gène/vecteur/hôte, le milieu de culture pour la production de la chitosanase Csn1794 sera optimisé par une approche basée sur un plan d'expériences.