Chitosane et streptomyces: régulation transcriptionnelle et diversité enzymatique

点击翻译按钮获取中文摘要

Le chitosane est un polysaccharide cationique produit à l'échelle industrielle à partir de carapaces de crustacés. Il possède de nombreuses applications en tant que biomatériau, agent phytoprotecteur ou produit naturel contribuant à la baisse du taux de cholestérol. Plusieurs de ces propriétés dépendent de son poids moléculaire - qui peut être aisément contrôlé par hydrolyse enzymatique à l'aide de chitosanases. Notre laboratoire a apporté des contributions significatives aux connaissances sur les chitosanases, surtout celles produites par les streptomycètes. Pour nos travaux futurs, nous proposons trois grands axes de recherche visant à élargir les connaissances sur les chitosanases mais aussi sur les rapports physiologiques des microorganismes avec le chitosane - dont la présence va s'accentuer dans l'environnement en fonction de la croissance de sa production et de son utilisation. Nous proposons d'étudier la régulation transcriptionnelle d'un gène de chitosanase de Streptomyces par le biais d'une analyse fine de l'interaction du régulateur transcriptionnel avec le motif régulateur de ce gène. Cette étude sera menée in vitro mais aussi in vivo en construisant divers mutants touchant cette interaction. Le second volet vise à élucider le mécanisme de transport des produits de dégradation du chitosane (oligosaccharides) dans la cellule et à identifier les enzymes intracellulaires responsables de l'hydrolyse de ces oligosaccharides en monomères. Le troisième volet se penche sur la diversité enzymatique et physiologique des chitosanases. Il vise à comprendre pourquoi certains streptomycètes possèdent jusqu'à cinq chitosanases - en identifiant les différences dans l'action de ces enzymes et dans la transcription de leurs gènes respectifs. On y examinera aussi l'activité de ces chitosanases face à des substrats autres que le chitosane - comme le peptidoglycane désacétylé ou un polymère mixte: la chitosane-glucane. Ces recherches originales étendront nos connaissances sur ces enzymes, leur régulation et leur rôle physiologique.