Le système chitinolytique de Streptosporangium roseum: régulation transcriptionnelle et diversité enzymatique

很有趣des chercheurs et de L 'industrie倒les寡糖(选择)派生de la chitine et du chitosane(印版desacetylee de la chitine) est grandissant du辅助结束角度d 'application en医学院humaine veterinaire, en cosmetologie, en phytoprotection等等。Les CHOS peuvent être obtenus par水解酶de la几丁质，主要是酶的酵素和酶的酵素。几丁质酶GH18和GH19是几丁质酶的一种水解酶类。壳聚糖酶GH8和GH46，壳聚糖家族的“exo”型酶GH3和GH9以及壳聚糖单加氧酶AA10。La plupart de des ggines sonsonpracimdys . d'une ssamquence palindromique similaire celle conue parle pracomyces lividans, bien caracimris<s:1> parternlaboratory。研究了可能区分玫瑰葡萄放线菌的变异模式。后代蔷薇可能的双蔷薇压力tr<e:1>类似于CsnR。我将提出三个建议，分别是：交换交换、交换交换、交换交换、交换交换、交换交换、交换交换、交换交换、交换交换、交换交换、交换交换、交换交换、交换交换、交换交换和交换交换。这些突变体是由两个抑制因子组成的，它们分别是：这些突变体的转录组（Q-PCR）与其他突变体的转录组（Q-PCR）相同。两个可变的可变的可变的可变的可变的可变的可变的可变的可变的可变的。Nous postulons que les mutants, dsamo - resamo - primsamo，产品与鸡尾酒酶，几丁质水解物même在没有诱导剂的情况下，dans，环境相容性，在生物技术中的应用。将酵素转化为鸡尾酒、纯化的酵素、纯化的酵素转化为新生物化学的酵素、酵素转化为酵素的酵素、酵素转化为酵素的酵素。鸡尾酒糖苷être的组合物操纵了<s:1> <s:1>胺基酸酯、<s:1>胺基酸酯、<s:1>胺基酸酯和<s:1>胺基酸酯的组合物，使某些糖类失去活性，例如，对己糖酶、外几丁质酶进行了加工，对<s:1>胺基酸酯的组合物进行了生产，而对寡糖的组合物则不起作用。1 .澳大利亚，将原逍遥期的<s:2> <s:2>逍遥期的逍遥期的逍遥期的逍遥期的逍遥期的逍遥期的逍遥期的逍遥期的逍遥期的逍遥期的逍遥期的逍遥期的逍遥期的逍遥期的逍遥期。玫瑰孢链菌可以产生不完整的几丁质水解酶，水解酶的水解作用可以形成几丁质和壳聚糖。La composition de de ce cocktail peut être影响和操纵了<s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> <s:1> - <s:1>)。

L’intérêt des chercheurs et de l’industrie pour les oligosaccharides (CHOS) dérivés de la chitine et du chitosane (forme desacétylée de la chitine) est grandissant dû aux nombreuses perspectives d’application en médecine humaine et vétérinaire, en cosmétologie, en phytoprotection etc. Les CHOS peuvent être obtenus par hydrolyse enzymatique de la chitine, mais les enzymes nécessaires sont encore peu disponibles. Une recherche bioinformatique nous a orienté vers l'actinomycète Streptosporangium roseum, dont le génome possède de nombreux gènes codant pour des enzymes chitinolytiques: chitinases GH18 et GH19; chitosanases GH8 et GH46, enzymes de type "exo" des familles GH3 et GH9 et des mono-oxygenases de la chitine (famille AA10). La plupart de ces gènes sont précédés d'une séquence palindromique similaire à celle reconnue par le répresseur csnR de Streptomyces lividans, bien caractérisé par notre laboratoire. Ce mode de régulation possible distingue S. roseum des autres actinomycètes étudiés. Cependant S. roseum possède deux répresseurs très similaires à CsnR. Il est proposé de caractériser ces deux répresseurs en purifiant les protéines respectives et en déterminant (par mesure des constantes d'affinité) leurs préférences aux diverses séquences opératrices présentes en amont des gènes chitinolytiques. Des mutants avec un ou deux represseurs délétés seront générés. Ces mutants seront étudiés par transcriptomique (Q-PCR) ainsi que par protéomique (axée sur les protéines secrétées). Nous établirons ainsi le rôle des deux répresseurs dans la régulation des gènes du complexe chitinolytique. Nous postulons que les mutants, dé-réprimés, produiront un cocktail d’enzymes chitinolytiques même en absence d’inducteur, dans des milieux de culture compatibles avec une utilisation en biotechnologie. Les enzymes du cocktail seront séparées, purifiées et caractérisées au niveau biochimique afin d’établir leur utilité pour la production de CHOS. La composition du cocktail pourra être manipulée ultérieurement par génie génétique: en inactivant certains gènes, par exemple ceux des hexosaminidases ou d'exo-chitinases de type processif, qui résulteraient en une production de monomères ou d’oligosaccharides de poids moléculaire trop faible. Aussi, des protéines exprimées de manière insuffisante pourront être exprimées à partir d'un vecteur de génie génétique de type intégratif, sous le contrôle d'un promoteur constitutif.Streptosporangium roseum donne l'oportunité de produire un ensemble complet d'enzymes chitinolytiques, hydrolysant efficacament de nombreuses formes de chitine et de chitosane. La composition de ce cocktail peut être influencée par manipulation génétique.