食品级重组微生物表达系统构建与耐热乳糖酶的分泌表达

食品级表达系统具有重要的应用价值。以公认安全的Bacillus subtilis DB104为对象，以食品级质粒pTA1060为载体，分别尝试利用其D-丙氨酸营养缺陷型的互补基因和源自乳酸链球菌的乳酸链球菌素抗性基因为选择标记，构建枯草芽孢杆菌的食品级表达系统；研究利用Sec途径信号肽和Tat途径信号肽及有理设计的人工信号肽为蛋白质输出信号来构建食品级耐热乳糖酶的分泌表达质粒；研究食品级重组菌与出发菌生理特性差异，对比基于两种选择标记的食品级表达系统的遗传稳定性，研究耐热乳糖酶的分泌表达，并对信号肽的分泌表达进行优化。.项目预期成果是构建一个新的基于枯草芽孢杆菌的食品级表达系统，实现耐热乳糖酶的高效分泌表达，为食品级重组微生物在食品饲料中的应用提供理论基础，具有较大的潜在应用价值；研究利用分泌信号肽实现耐热乳糖酶在芽孢杆菌中的分泌表达，为特定蛋白质实现分泌和分泌优化提供一个新的研究方法。