在鼻咽癌中调控关键抑癌基因TGFBR2的miRNAs的鉴定及功能研究

我们前期研究发现TGFBR2在鼻咽癌中表达下调，但国内外仍然没有人报道在鼻咽癌中是否存在miRNAs调控TGFBR2的机制。本项目通过比较全面的研究，探索鼻咽癌中可能存在的miRNA介导的TGFBR2下调机制。我们首先证实在鼻咽癌进展过程中TGFBR2的下调是一种不良预后因子，50%以上的鼻咽癌病人其不良预后都与TGFBR2低表达相关。接着，通过临床分析、生物信息学分析和报告基因系统分析等手段发现了5个比较重要的miRNA可能直接调控TGFBR2，并对其中两个比较重要的miRNA (miR-93和miR-20a）进行了进一步的功能和机制的探讨。体内、外实验证实这两个miRNA能够促进鼻咽癌细胞的生长增殖和侵袭转移能力，并可能参与了鼻咽癌细胞EMT的过程。然后，我们进一步发现miR-93和miR-20a介导的TGFBR2下调能导致TGFB-1的细胞内表达和细胞外分泌增加，PI3K/Akt通路活性也有所加强，并影响Smad3的磷酸化水平和细胞周期和EMT相关蛋白的变化。提示：在鼻咽癌进展中，miRNA介导的TGFBR2下调的TGFB通路失活与PI3K/Akt激活有着一种潜在性的相互影响，这种影响可能导致鼻咽癌向恶性进展。最后，临床数据进一步支持miR-93和miR-20a的表达与鼻咽癌分期、淋巴结转移以及临床病理分级相关。该项目首次报告了鼻咽癌中存在miRNA介导的TGFBR2的下调机制以及其促进鼻咽癌临床进展的作用。. 另外，我们在该项目进行过程中，还获得两个更新的发现：（1）发现一个新的病毒的miRNA (Hcmv-miR-ul148D)与miR-93和miR-20a聚类在一起，也在鼻咽癌组织标本中高表达，经研究初步发现与miR-20a和miR-93有类似的功能和作用。有关人群和临床标本验证研究在进行之中。（2）利用生物芯片技术还发现EB病毒编码的几个重要的miRNA 在鼻咽癌中发挥着很重要的作用，其中miR-BART1、miR-BART7和miR-BART3等表达水平最高，初步发现与鼻咽癌发生发展关系密切。我们将在今后针对这两方面开展深入的研究。