Mechanismen der Zell- und Isoformspezifität Gi-Protein-abhängiger Signalwege in Entzündungszellen

对百日咳毒素敏感的gi -蛋白Gi2和Gi3在趋化因子和过敏毒素感受器中的作用在鼠<s:1> hrt死亡非选择性Inaktivierung aller gi - protein durch百日日毒zu einer暴发性免疫系统中，während死亡构成性Inaktivierung singulärer Gi-kodierender基因vergleichsweise milde Phänotypen zur Folge。Es ist derzeit ungeklärt, ob die beobachteten Phänotypen or allem auf Gendosis-Effekte zurkzuf<e:1> hren sind and Gi-lsoformen redundante rolen haben, oder ob die einzelnen Gi-lsoformen auch in vivo spezifische funcktionen aus<e:1> ben。Wir haben在vorarbeen和G -i-defizienten Mauslinien erstals的异构体和interessanweise，在zelltype -spezifische功能和gi - protein在zelltype -spezifische功能和gi - protein在zelltype -spezifische免疫系统鉴定。所以ist Gi2 not enddig und ausreichend f<e:1> r die c5 - industrierte Chemotaxis von Makrophagen。Hingegen können Gi2和Gi3 beder C5a-abhängigen趋化性中性粒细胞Granulozyten <s:2> reinander取代物，和erst die funktionelle Entkopplung beider gi - protein vom c5 - rezeptor durch百日毒ist在大鼠，die gerichtete迁移von Granulozyten vollständig zu inhibien。[2] [endnotersuchungen .] [endnoteref .] [endnoteref .] [endnoteref .] [endnoteref .] [endnoteref .]传染性疾病intrazellulären大肠杆菌与溶酶体融合的研究[j]。Ausgehend von diesen Befunden möchten wir nun systematisch die biologische Rolle von Gi2 and Gi3 in der anti-infektiösen Effektorantwort von entz<e:1> ndungszellen近端和远端der Plasmamembran untersuchen。生物化学，生物生物学和生物遗传学方法研究[j]1 - 1 - 1 - 1 - 2 - 1 - 2 - 1 - 2 - 1 - 2 - 1 - 2 - 1 - 2 - 1 - 2 - 1 - 2 - 2 - 1 - 2 - 2 - 1 - 2 - 2 - 2 - 2 - 2 - 2 - 1。侵染病原菌（vom inviderenden pathogens bis hin zur zellulären）在gi2-和gi3-defizienten mauslinen的鉴定和schließlich。1 . Die Ergebnisse dieser Untersuchungen lassen grundlegende Erkenntnisse zur Rolle von Gi-Proteinen, Effektoren einer Vielfalt，其中老虎病原体和entz<e:1> ndundunsmediatoren erwarten和sollen zengenzu einem detailliten Verständnis der molecular ularen Grundlagen der Infektabwehr beitragen。

Die Pertussistoxin-sensitiven Gi-Proteine Gi2 und Gi3 sind gemeinsame Effektoren der Signalkaskaden von Chemokin- und Anaphylatoxinrezeptoren auf Entzündungszellen. In der Maus führt die unselektive Inaktivierung aller Gi-Proteine durch Pertussistoxin zu einer fulminanten Entgleisung des Immunsystems, während die konstitutive Inaktivierung singulärer Gi-kodierender Gene vergleichsweise milde Phänotypen zur Folge hat. Es ist derzeit ungeklärt, ob die beobachteten Phänotypen vor allem auf Gendosis-Effekte zurückzuführen sind und Gi-lsoformen redundante Rollen haben, oder ob die einzelnen Gi-lsoformen auch in vivo spezifische Funktionen ausüben. Wir haben in Vorarbeiten an Gi-defizienten Mauslinien erstmals Isoform- und interessanterweise auch Zelltyp-spezifische Funktionen von Gi-Proteinen in Zellen des angeborenen Immunsystems identifiziert. So ist Gi2 notwendig und ausreichend für die C5a-induzierte Chemotaxis von Makrophagen. Hingegen können Gi2 und Gi3 bei der C5a-abhängigen Chemotaxis neutrophiler Granulozyten füreinander substituieren, und erst die funktionelle Entkopplung beider Gi-Proteine vom C5a-Rezeptor durch Pertussistoxin ist in der Lage, die gerichtete Migration von Granulozyten vollständig zu inhibieren. In weiteren Untersuchungen zu Isoform-spezifischen Funktionen von Gi- Proteinen konnten wir eine neuartige Lokalisation und Rolle von Gi3 auf Autophagosomen verschiedener Zellen beschreiben. Diese intrazellulären Organellen spielen nach der Fusion mit Lysosomen in Entzündungszellen eine zentrale Rolle bei der Immunabwehr bakterieller und viraler Pathogene. Ausgehend von diesen Befunden möchten wir nun systematisch die biologische Rolle von Gi2 und Gi3 in der anti-infektiösen Effektorantwort von Entzündungszellen proximal und distal der Plasmamembran untersuchen. Hierzu sollen mit biochemischen, zellbiologischen und mausgenetischen Methoden Gi-lsoform-spezifische Effektorprogramme vom Rezeptor bzw. vom invadierenden Pathogen bis hin zur zellulären Antwort identifiziert und schließlich in Gi2- und Gi3-defizienten Mauslinien charakterisiert werden. Die Ergebnisse dieser Untersuchungen lassen grundlegende Erkenntnisse zur Rolle von Gi-Proteinen als Effektoren einer Vielfalt wichtiger Pathogene und Entzündungsmediatoren erwarten und sollen zu einem detaillierten Verständnis der molekularen Grundlagen der Infektabwehr beitragen.