Die Rolle der DNA-Methylierung und der DNA-Methyltransferase bei der zerebralen Ischämie

DNA-甲基化是通过酶DNA-（胞嘧啶-5）-甲基转移酶（MTase，E.C. 2.1.1.37）katalysiert und ist wichtig für die Regulierung der Genexpression.在Schlaganfall中可以找到DNA序列的基因表达。通过对MTase在体内的表达和活性的研究，可以发现这些损伤是由（I）引起的。Mittels transgener Mäuse，denen（a）constitutiv oder（B）konditional neuronal das DNA-Methyltransferase（dnmt）fehlt and die somit weniger MTase exhiberen，soll（II）gezeigt韦尔登，davideine Verringerung der MTase-Spiegel zu Verringerung zu veränderten Methylerungsmustern nach Schlagangall führt and davidiese Tiere vor Schlaganfall geschützt sind. Somit würde estmals ein unmittelbarer Zusammenhang zwischen DNA-Methylierung und Ischämieschaden nachgewiesen韦尔登.在第三部分中，我们讨论了神经保护机制的研究韦尔登。(a)基因表达研究（mittels subtraktiver Hybridisierung oder DNA Mikrochips）解决了遗传学的问题，通过外遗传学理论（epigenetische Theorie）验证甲基化。(b)只有韦尔登，才能在MTA上找到一个方向（ggf.致突变剂），基因组遗传学研究CHIP-Mutanten（genetische Theorie）。Unsere Untersuchungen könnten somit erstmals einen Einfluenza der DNA-Methylierung bei iner akuten Erkrankung nachweisen，was wegweisend für andere Krankheitsbilder wäre（z.B.炎症、休克、有机体等）。

Die DNA-Methylierung wird durch das Enzym DNA-(Cytosin-5)-Methyltransferase (MTase, E.C. 2.1.1.37) katalysiert und ist wichtig für die Regulierung der Genexpression. Beim Schlaganfall kommt es zu DNA-Schäden sowie Genexpressionsveränderungen. Gegenstand diese Antrages soll deshalb (I) sein zu untersuchen, ob sich nach zerebraler Ischämie die Expression und Aktivität der MTase sowie die Methylierungsrate in vivo ändern. Mittels transgener Mäuse, denen (a) konstitutiv oder (b) konditionalneuronal das DNA-Methyltransferasegen (dnmt) fehlt und die somit weniger MTase exprimieren, soll (II) gezeigt werden, daß eine Verringerung der MTase-Spiegel zu veränderten Methylierungsmustern nach Schlagangall führt und daß diese Tiere vor Schlaganfall geschützt sind. Somit würde erstmals ein unmittelbarer Zusammenhang zwischen DNA-Methylierung und Ischämieschaden nachgewiesen werden. Im weiteren (III) soll der neuroprotektive Mechanismus erarbeitet werden. (a) Genexpressionsstudien (mittels subtraktiver Hybridisierung oder DNA Mikrochips) sollen feststellen, ob veränderte Methylierungsmuster zu Transkriptionsveränderungen führen (epigenetische Theorie). (b) Zum anderen soll getestet werden, ob die MTAse einen direkten (ggf. mutagenen) Einfluß auf den Zellschaden hat; u.a. mittels Gendosis Wirkungsstudien an CHIP-Mutanten (genetische Theorie). Unsere Untersuchungen könnten somit erstmals einen Einfluß der DNA-Methylierung bei einer akuten Erkrankung nachweisen, was wegweisend für andere Krankheitsbilder wäre (z.B. Inflammation, Schock, Organischämie etc.).