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Aufklärung der Funktion der intrazellulären Domänen von Kinin-Rezeptoren bei Signaltransduktion, Internalisierung und Degradation

Aufklärung der Funktion der intrazellulären Domänen von Kinin-Rezeptoren bei Signaltransduktion, Internalisierung und Degradation
阐明激肽受体胞内结构域在信号转导、内化和降解中的功能
批准号:
5298706
负责人:
Professor Dr. Alexander Faußner
金额:
$0.0万
依托单位国家:
德国
项目类别:
Research Grants
财政年份:
2001
资助国家:
德国
项目状态:
已结题
起止时间:
2000-12-31 至 2003-12-31

项目摘要

项目成果

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中文摘要
翻译
Kinin-Rezeptoren模型解决了G-蛋白质结合蛋白(GPCRs)在细胞内信号转导、Rezeptorinternalisierung和Rezeptorabbaus untersucht韦尔登的作用。B2 Kinin-Rezeptors的嵌合表达,如GPCRs的内化和激活,以及B1 Kinin-Rezeptors的非内化,因此内化,但在Säugetierzellen中不激活蛋白酶激活的Rezeptoren Par 1和Par 2,因此韦尔登可以估计,无论是国内的还是国外的。通过酵母双杂交系统(CytoTrap/Stratagene)进行免疫重组,可以将细胞溶解和膜蛋白质特异性结合起来,通过细胞内重组蛋白质鉴定韦尔登。用质粒稳定转染,用正义和反义测序的四环素调节基因启动子,如阿尔滕,用选择性蛋白质的GPCR(如Z.B. G-蛋白质的抑制、抑制、再活化等作用,可使细胞韦尔登,从而使蛋白质控制(尤伯)发挥作用。支持韦尔登的人。在这段时间里,他们通过(短暂的)GPCR进行了基因测序,并通过生物方法进行了韦尔登。
英文摘要
Am Modell der Kinin-Rezeptoren sollen die Funktionen der intrazellulären Domänen von G-Protein-gekoppelten Rezeptoren (GPCRs) bei der Signaltransduktion, der Rezeptorinternalisierung und des Rezeptorabbaus untersucht werden. Durch Expression von Chimären des B2 Kinin-Rezeptors, der wie die meisten GPCRs internalisiert und rezyklisiert wird, und des nicht internalisierenden B1 Kinin-Rezeptors, sowie der internalisierenden, aber nicht rezyklisierenden Protease-aktivierten Rezeptoren Par 1 und Par 2 in Säugetierzellen soll bestimmt werden, welche Domänen an der Internalisierung und am Abbau dieser Rezeptoren beteiligt sind. Durch Immun-Kopräzipitation sowie durch ein Yeast Two-Hybrid-System (CytoTrap/Stratagene), das speziell für cytosolische und membranständige Proteine entwickelt wurde, sollen mit den intrazellulären Rezeptordomänen interagierende Proteine identifiziert werden. Durch stabile Transfektion mit Plasmiden, die Tetracyclin-regulierbare Promotoren mit Sense- und Anti-Sense-Sequenzen von neugefundenen, wie auch von alten, bekanntermassen mit GPCRs wechselwirkenden Proteinen (wie z.B. G-Proteinuntereinheiten, Arrestinen, Rezeptorkinasen) enthalten, sollen Zelllinien geschaffen werden, in denen diese Proteine kontrolliert (über)exprimiert bzw. supprimiert werden können. Auf diese Weise könnten ihre Wechselwirkungen mit (transient) koexprimierten GPCRs einfacher und genauer untersucht werden als mit den bisherigen Methoden.
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