Struktur und Funktion von Komponenten der bakteriellen Signaltransduktion und ihre Interaktion mit Proteinen und Proteindomänen des bakteriellen Phosphotransferasesystems

Inzwischen ist die Beteiligung des PTS和der细菌的信号转导。Von besonderem Interesse ist dabei die <e:1> berwigend in gramposiven Bakterien vorkommende bifunktionelle HPr- kinase /Phosphatase, die das phosphoer protein HPr and serin46 ATP-abhängig phospyliertEinerseits将dadurch死Phosphorylierung冯HPr的军队死Histidinkinase Enzym我des分鲜明gehemmt和该死死Aufnahme冯PTS-Zuckern eingeschrankt。研究了其产物P-Ser-HPr及其分解代谢控制蛋白CcpA - einen复合物，der和cred - dna序列结合，可降解操纵子。grampositive bakteren中kataboli抑制的死亡。Dr. Klaus Scheffzek, EMBL Heidelberg, gelöst werden。HPr、HPr-激酶、atp类似物与HPr-激酶的相互作用。HPrkinase的词性：struckturuntersuchungen soll die Substratspezifität der HPrkinase durch kinetische Messungen analysis， werden。2 . Die Proteinkomponenten des Glukonat-spezifischen PTS，在粪肠球菌nachgewiesen wurde的研究中，研究了肠道异源性<s:1>实验。Mit Glukonat-spezifischem酶IIA konnten bereits Kristalle erhalten werden， die bis 3Å streuen （Zusammenarbeit Mit B. Dijksta, Groningen， NL）。Die Glukonat-spezifische IIB-Domäne bildet mit der IIA-Domäne einen stabilen complex, der structurell - weterteriseret。在Zusammenarbeit mit proteinkturlabor中，H.E. Meyer教授werden massenspetrometrische Verfahren zur sequenzspezifischen Zuordnung von phosphohitidinresten In Proteinen ausgearbeet。

Inzwischen ist die Beteiligung des PTS an der bakteriellen Signaltransduktion klar gezeigt worden. Von besonderem Interesse ist dabei die überwiegend in grampositiven Bakterien vorkommende bifunktionelle HPr-Kinase/Phosphatase, die das Phosphocarrierprotein HPr an Serin 46 ATP-abhängig phosphoryliert. Einerseits wird dadurch die Phosphorylierung von HPr durch die Histidinkinase Enzym I des PTS stark gehemmt und damit die Aufnahme von PTS-Zuckern eingeschränkt. Andererseits bildet P-Ser-HPr mit dem Catabolite Control Protein CcpA einen Komplex, der an cre-DNA-Sequenzen bindet, die katabolischen Operons vorgelagert sind. Dies bewirkt Katabolitrepression in grampositiven Bakterien. Die Struktur der HPr-Kinase aus Staphylococcus xylosus konnte in Zusammenarbeit mit Dr. Klaus Scheffzek, EMBL Heidelberg, gelöst werden. Danach wird die Kristallisation von Komplexen aus HPr und HPr-Kinase und aus ATP-Analogen mit HPrkinase versucht. Begleitend zu Strukturuntersuchungen soll die Substratspezifität der HPrkinase durch kinetische Messungen analysiert werden. Die Proteinkomponenten des Glukonat-spezifischen PTS, das bisher nur in Enterococcus faecalis nachgewiesen wurde, lassen sich gut heterolog überexprimieren. Mit Glukonat-spezifischem Enzym IIA konnten bereits Kristalle erhalten werden, die bis 3Å streuen (Zusammenarbeit mit B. Dijksta, Groningen, NL). Die Glukonat-spezifische IIB-Domäne bildet mit der IIA-Domäne einen stabilen Komplex, der strukturell weiter charakterisiert werden soll. In Zusammenarbeit mit dem Proteinstrukturlabor Prof. Dr. H.E. Meyer werden massenspektrometrische Verfahren zur sequenzspezifischen Zuordnung von Phosphohistidinresten in Proteinen ausgearbeitet.