Funktionelle Charakterisierung der Adaptorproteine Stonin 1 und gamma-BAR beim intrazellulären Membrantransport

Intrazellulärer膜转运的研究进展：膜转运蛋白与转运蛋白之间的关系。Von besonderer Bedeutung sind disease Prozesse in Neuronen， wo区分Membrandomänen， die axonale and die somatdendritische Plasmamembran, in der Trennung ein- and ausgehender Signale während der neuronalen Reizleitung impliziert sind。因此，我们在研究中发现了一种新的适应蛋白，即stonin1和2、2C18、HIP1、ARH、Hrs等，并对其进行了鉴定。在dem vorgeschlagenen项目计划中，durch，组合分子遗传学家，zell生物学家和生物化学家Ansätze Einblicke在《适应蛋白stonin1和2C18的功能》中的研究intrazellulären神经细胞中蛋白质的膜转运研究。因此，sollen研究了其新interaktionpartner von stonin1和2C18 （Hefe - 2- hybridscreens， Affinitätschromatographie和Ko-Immunpräzipitationsexperimente）在RNA-Interferenz-Verfahren组合鉴定和功能细胞特性研究中的应用。Wir möchten darberhinaus Einblicke在die putative的功能dieser adaptorprotein beder intrazellulären Sortierung von膜相关蛋白。【大足细胞生理学】影响rna -干扰素诱导蛋白表达（'knockdown'）的1 oder 2C18细胞内蛋白和细胞内蛋白intrazellulären质膜- rezeptoren和轴突膜蛋白转运的研究。Ergänzend planen与durch的分离与特性分析与传输特性研究zusätzliche Einblicke in Stonin 1 bzw。2c18 vermittelte Sortierungsvorgänge zu gewinnen。Schließlich möchten wir durch erzeeugung induzierber knockout -out Mauslinien die physiologische Rolle von stonin1 and 2C18 im organismischen Kontext sowie aufder zellulären Ebene untersuchen。Zur phänotypischen分析der erhaltenen Knockout-Mäuse sollen dann sowohl biochemische und zellbiologische Methoden，也称为auch electrophysiologische Verfahren angewandt werden。Wir warten， dass die vorgeschlagenen Untersuchungen zu unserem grundlegenden Verständnis des极化膜在神经元之间的转运。

Intrazellulärer Membrantransport erfordert die Wechselwirkung von Adaptorproteinen mit Membran-Cargoproteinen und deren Sortierung in Transportvesikel. Von besonderer Bedeutung sind diese Prozesse in Neuronen, wo distinkte Membrandomänen, die axonale und die somatodendritische Plasmamembran, in der Trennung ein- und ausgehender Signale während der neuronalen Reizleitung impliziert sind. So sind in den vergangenen Jahren neue akzessorische Adaptorproteine wie Stonin 1 und 2, 2C18, HIP1, ARH, Hrs etc. identifiziert worden, welche spezialisierte Funktionen bei der Erkennung und Sortierung von Membranproteinen übernehmen. In dem vorgeschlagenen Projekt planen wir, durch Kombination molekulargenetischer, zellbiologischer und biochemischer Ansätze Einblicke in die Funktion der monomeren Adaptorproteine Stonin 1 und 2C18 im intrazellulären Membrantransport sowie der polaren Sortierung von Proteinen in Neuronen zu untersuchen. So sollen einerseits neue Interaktionspartner von Stonin 1 und 2C18 durch Hefe 2-Hybrid-Screens, Affinitätschromatographie und Ko-Immunpräzipitationsexperimente in Kombination mit RNA-Interferenz-Verfahren identifiziert und funktionell charakterisiert werden. Wir möchten darüberhinaus Einblicke in die putative Funktion dieser Adaptorproteine bei der intrazellulären Sortierung von Membran-assoziierten Proteinen gewinnen. Dazu sollen die physiologischen Effekte eines durch RNA-Interferenz induzierten Expressionsverlustes ('knockdown') von Stonin 1 oder 2C18 auf die Internalisierung und den intrazellulären Transport von Plasmamembran-Rezeptoren und axonalen Membranproteinen studiert werden. Ergänzend planen wir durch Isolierung und Charakterisierung von Transportvesikeln zusätzliche Einblicke in Stonin 1 bzw. 2C18-vermittelte Sortierungsvorgänge zu gewinnen. Schließlich möchten wir durch Erzeugung induzierbarer Knock-out Mauslinien die physiologische Rolle von Stonin 1 und 2C18 im organismischen Kontext sowie auf der zellulären Ebene untersuchen. Zur phänotypischen Analyse der erhaltenen Knockout-Mäuse sollen dann sowohl biochemische und zellbiologische Methoden, als auch elektrophysiologische Verfahren angewandt werden. Wir erwarten, dass die vorgeschlagenen Untersuchungen zu unserem grundlegenden Verständnis des polarisierten Membrantransportes insbesondere in Neuronen beitragen werden.