Bewegung der c-Untereinheiten in der H+-ATPsynthase aus E. coli bei ATP-Synthese und ATP-Hydrolyse (Zusatzantrag: Immobilisierung und Fluoreszenzmarkierung der H+-ATPsynthase aus E. coli mit Quantum dots)

大肠杆菌 H -ATP 合酶中 c 亚基在 ATP 合成和 ATP 水解过程中的运动(附加应用:用量子点固定和荧光标记大肠杆菌 H -ATP 合酶)

基本信息

项目摘要

H+-ATPasen sind zentrale Enzyme des Energiestoffwechsels in allen Zellen. Sie koppeln den transmembranen Protonentransport mit der Synthese von ATP und sie haben einen unge-wöhnlichen Mechanismus: Bei der Katalyse dreht sich ein Teil der Untereinheiten (Rotor) gegenüber den anderen Untereinheiten (Stator) wie bei einem Motor (Nanomotor). In diesem Vorhaben wird die Bewegung der membranintegrierten c-Untereinheiten gegenüber dem Stator (b-Untereinheit) und gegenüber den anderen Rotoruntereinheiten an einzelne Enzymmolekülen gemessen. Hierzu werden die verschiedenen Untereinheiten selektiv mit Fluoreszenzfarbstoffen markiert. Die Messung der Effizienz des Fluoreszenzresonanzenergietransfers zwischen diesen Fluorophoren an Einzelmolekülen erlaubt es zeitaufgelöst die Abstände und Abstandsänderungen zwischen den Untereinheiten bei der Katalyse (ATP Synthese, ATP Hydrolyse, Protonentransport) zu ermitteln. Ziel ist es, experimentell die Rotation der c-Untereinheiten im intakten membrangebundenen Enzym bei der ATP Synthese zu zeigen, Abstandsänderungen zwischen den Rotoruntereinheiten bei Synthese und Hydrolyse zu untersuchen und die Übergänge zwischen aktiven und inaktiven Enzymzuständen zu ermitteln.
H ~+-ATP酶是艾伦体内重要的能量代谢酶。通过ATP的合成研究跨膜质子转运,发现了一种新的机制:在Katalyse dreht sich ein Teil der Untereinheiten(Rotor)gegenüber den anderen Untereinheiten(Stator)wie bei einem Motor(Nanjing)。在这种情况下,薄膜集成的定子(b-转子)和转子之间的连接将产生一种酶。Hierzu韦尔登是一个有着独特标志的绿色建筑。荧光团与分子间共振能量转移效率的测量是对催化剂(ATP合成、ATP水解、质子转运)的吸收和吸收的一种有效测量。Ziel is es,experimentell die Rotation der c-Untereinheiten im intakten membrangebundenen Enzyme bei der ATP Synthese zeigen,Abstandsänderungen zwischen der Rotoruntereinheiten bei Synthese and Hydrolyse zuuntersuchen and die Übergänge zwischen aktiven and inaktiven Enzymzuständen zermitteln.

项目成果

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