In vitro und in vivo Analyse von DOMINO, einem ATP-verbrauchenden Histon-Austausch-Faktor aus der Familie der "split"-ATPasen

在真核生物中，DNA的核小体异常会影响所有核细胞的进程。ATP染色质重塑机代表了一个酶群，对核小体DNA的影响。您的DNA通过组蛋白-变体调节或调节组蛋白。本研究以果蝇DOMINO为研究对象，通过对两组数据的研究，发现了一个具有分裂型ATP酶重塑、生化和功能的家族。 Split -ATP酶被认为是一种不稳定的酶，两种ATP酶/Helikase Domäne auf。我们将使用DOMINO复合物从果蝇胚胎中提取和从DOMINO-Zelllinien isolieren稳定的提取物中进行常规的Reinigung、Affinitätsreinigung和Immun- Präzipitationen。平行的大韦尔登我们也有同样的爱好，并有DOMINO的特点。DOMINO复合物的分子功能将在最佳测试系统中得到验证。DOMINO-通过最好的韦尔登国际研究联合解决了生物化学特性和关联问题。我们将对DOMINO的体内相关性进行胚胎发生的转基因和原位定位研究。

In Eukaryonten beeinflusst die nukleosomale Anordnung der DNA nahezu alle nuklearen Prozesse. ATP-verbrauchende Chromatin Remodelling Maschinen repräsentieren eine Gruppe von Enzymen, die Einfluss auf die nukleosomale DNA nehmen. Sie öffnen DNA Bereiche für Regulatoren oder ersetzen Histone durch bestimmte Histon-Varianten. Im Zuge dieses Projektes soll Drosophila DOMINO, ein Vertreter der bis dato noch wenig erforschten Familie der so genannten split -ATPase Remodeller , biochemisch und funktionell untersucht werden. Split - ATPasen weisen eine ungewöhnliche, zweigeteilte ATPase/Helikase Domäne auf. Wir wollen DOMINO Komplexe mittels konventioneller Reinigung, Affinitätsreinigung und Immun- Präzipitationen aus Drosophila Embryoextrakten und aus stabil exprimierenden DOMINO-Zelllinien isolieren. Parallel dazu werden wir auch Affinität-gereinigtes, rekombinantes DOMINO charakterisieren. Die molekulare Funktion von DOMINO sowie der DOMINO Komplexe wird in bestehenden Testsystemen untersucht und verglichen werden. DOMINO-assoziierte Untereinheiten sollen biochemisch charakterisiert und deren Assoziation durch Interaktionsstudien bestätigt werden. Die in vivo Relevanz von DOMINO wollen wir mittels transgenen Fliegen und in situ Lokalisationsstudien während der Embryogenese untersuchen.