Mechanism for diversifying the branched structure of GPI elucidated by interdisciplinary research in glycochemistry and glycobiology

昨年度、N-アセチルガラクトサミン（GalNAc）付加GPIの部分構造である四糖（トリマンノース[triMan]+GalNAc）骨格構築に成功した。今年度は、GalNAc付加GPIおよび四糖蛍光プローブ合成に向けて、triManをモデル基質としてN-メチルアンドラニロイル（MANT）修飾エタノールアミンリン酸（EtNP）基の導入に取り組んだ。まず、triManの還元末端Man2位水酸基に1H-テトラゾール存在下でN-Boc保護EtNホスホロアミダイトを作用させた後、リン五価への酸化を行い、目的とするリン酸トリエステル体を高い収率で得た。続いて、triManの非還元末端Man6位水酸基を遊離にさせた後、別途調製したN-Boc保護MANT修飾EtNホスホロアミダイトとの亜リン酸エステル化に付したところ、反応は良好に進行した。リン五価への酸化反応後にリン酸トリエステル体として単離を試みたが、副生成物との分離が困難であった。そこで、DBUによるシアノエチル基の除去でリン酸ジエステル体としたところ、イオン交換クロマトグラフィーで目的生成物の単離に成功した。最後に、酸性条件ですべての保護基を除去し、MANT修飾EtNP基が導入されたtriManモデル蛍光プローブの合成を達成した。今後、本モデル実験で確立したMANT修飾EtNP基導入法を利用して、GalNAc付加GPIおよび四糖蛍光プローブ合成が達成できると考えられる。また、GPI骨格構築で必要となるグルコサミン（Glc）、イノシトール（Ins）、グリセロール脂質ビルディングブロックを調製した。

昨年度、N-アセチルガラクトサミン（GalNAc）付加GPIの部分構造である四糖（トリマンノース[triMan]+GalNAc）骨格構築に成功した。今年度は、GalNAc付加GPIおよび四糖蛍光プローブ合成に向けて、triManをモデル基質としてN-メチルアンドラニロイル（MANT）修飾エタノールアミンリン酸（EtNP）基の導入に取り組んだ。まず、triManの還元末端Man2位水酸基に1H-テトラゾール存在下でN-Boc保護EtNホスホロアミダイトを作用させた後、リン五価への酸化を行い、目的とするリン酸トリエステル体を高い収率で得た。続いて、triManの非還元末端Man6位水酸基を遊離にさせた後、別途調製したN-Boc保護MANT修飾EtNホスホロアミダイトとの亜リン酸エステル化に付したところ、反応は良好に進行した。リン五価への酸化反応後にリン酸トリエステル体として単離を試みたが、副生成物との分離が困難であった。そこで、DBUによるシアノエチル基の除去でリン酸ジエステル体としたところ、イオン交換クロマトグラフィーで目的生成物の単離に成功した。最後に、酸性条件ですべての保護基を除去し、MANT修飾EtNP基が導入されたtriManモデル蛍光プローブの合成を達成した。今後、本モデル実験で確立したMANT修飾EtNP基導入法を利用して、GalNAc付加GPIおよび四糖蛍光プローブ合成が達成できると考えられる。また、GPI骨格構築で必要となるグルコサミン（Glc）、イノシトール（Ins）、グリセロール脂質ビルディングブロックを調製した。