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Study of heterotrimeric G protein regulating organ size in rice

异源三聚体G蛋白调节水稻器官大小的研究

基本信息

批准号：
21K05528
负责人：
岩崎行玄
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Fukui Prefectural University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

花組織に着目し、イネ3量体Ｇタンパク質複合体を構成する7種類のコアサブユニットを定量した。定量結果は、WBで得られたngを、分子量で除することにより、molで表記した。植物材料は、T65（野生型）、GS3（Gγ3ヌル変異体）、Mi（Gγ3ΔCis変異体）、およびd1（Gαヌル変異体）を用いた。組織は、花に着目した。上記4種類のイネより、おのおの粗ミクロソーム画分を調製後、水性2層分配法により細胞膜画分を調製した。実験スケールは、将来、免疫沈降実験を視野に入れ、毎回、細胞膜300μgタンパク質を出発とした。Gαサブユニットは、T65、GS3、Mi、それぞれ、17、15、15 pmolであった。Gβサブユニットは、T65、GS3、Mi、d1の細胞膜300μgタンパク質当たり、それぞれ、96、83、83、64 pmolであった。Gγ1サブユニットは、T65、GS3、Mi、d1で、8、9、7、14 pmolであった。Gγ2サブユニットは、T65、GS3、Mi、d1で、１、１、１、１ pmolであった。Gγ3サブユニットは、T65、GS3、Mi、d1で、７、0（ヌル）、32、7 pmolであった。Gγ4サブユニットとGγ5サブユニットは、検出限界以下であった。この定量実験により、下記の点が明らかになった。Gβサブユニットは、T65、GS3、Miにおいて、Gαサブユニットより、およそ5倍多く存在する。次に、Gγ1～Gγ5の総和が、T65、GS3、Mi、d1で、およそ、17、10、40、21 pmolになるので、この値をGαサブユニット量と比べてみると、野生型はGα(1)：Gβ(1)：Gγs(1)の3量体、GS3はβγが少ないことによる単独のGαの存在、Miは過剰のβγによるGαの不活性化が推察された。

The flower tissue is composed of 7 kinds of protein and protein complexes. Quantitative results are recorded in terms of molecular weight and molecular weight. Plant materials such as T65 (wild-type), GS3 (Gγ 3ΔCis variant), Mi (Gγ3ΔCis variant), and D1 (Gα α α variant) are used. Organization, flower, eyes. The above four types of cell membrane separation are prepared by aqueous two-layer partition method. In the future, immune sedimentation will occur in the field of vision, and the cell membrane will be 300μg. Gαサブユニットは、T65、GS3、Mi、それぞれ、17、15、15 pmolであった。Gβ, T65, GS3, Mi, d1 cell membrane 300μg TANPACK is equivalent to,, 96, 83, 83, 64 pmol. Gγ1サブユニットは、T65、GS3、Mi、d1で、8、9、7、14 pmolであった。Gγ2サブユニットは、T65、GS3、Mi、d1で、1、1、1、1 pmolであった。Gγ3サブユニットは、T65、GS3、Mi、d1で、7、0（ヌル）、32、7 pmolであった。Gγ4 Gγ5 This is the first time I have ever seen such a person. Gβ, T65, GS3, Mi, Gα, 5 times more than In addition, Gγ1~Gγ5, T65, GS3, Mi, d1,, 17, 10, 40, 21 pmol, G α (1), Gβ(1), Gγs(1), GS3, G α(1), G α (2), G α (3), G α (4), G α (5), G α (6), G α (7), G α (8), G α (9), G α (1), Gγ (3), G α (9), G α (1), G α (9), G α (9), G α (1), G α (9), G α (1), G