高等植物原形質膜G蛋白質の構造、機能と器官特異性の解析

高等植物质膜G蛋白的结构、功能和器官特异性分析

• 批准号: 08262218
• 负责人: 岩崎 行玄
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Fukui Prefectural University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08262218/
• 关键词: いね; 原形質膜; 植物; シグナル情報伝達; 3量体G蛋白質

高等植物原形質膜G蛋白質の構造に関する研究1)ヘテロ3量体G蛋白質のβサブユニットと推定されるcDNAをイネより単離した。このcDNAを用いて、融合蛋白質を合成した後、特異抗体を調製した。この抗体と反応する産物(43kDa)は、原形質膜に局在していた。2)一昨年単離したαサブユニットのcDNAを用い、融合蛋白質を調製した後、その酵素機能の検討を行った。αサブユニット融合蛋白質は、GTPaseおよびGTPγS結合能を有し、コレラ毒素によるADPリボシル化を受けた。このADPリボシル化は、イネミクロソーム画分の存在下で数十倍増加した。また、このαサブユニットに対する特異抗体が、原形質膜の45kDaポリペプチドを特異的に認識することを明らかにした。マストパランを用いた高等植物原形質膜G蛋白質の機能に関する研究ヘテロ3量体G蛋白質の活性化剤であるマストパランを、原形質膜画分、個体および培養細胞に投与して以下の知見を得た。a)高等植物原形質膜画分のGTPase活性およびGTPγS結合能を増大させた。b)分子量、45kDaのprotein kinaseの自己リン酸化能を増大した。c)phenylalanine ammonia-lyase (PAL)遺伝子の転写産物が増大した。phospholipase A2、phospholipase C、phospholipase D、カルシウムチャンネル、カリウムチャンネル等の活性およびH_2O_2の発生などに、3量体G蛋白質が関与することが示唆されているので、今後、これらの活性変動にマストパランが関与するか否かを計画している。

Higher plants prototype plasma membrane G protein の tectonic に masato す る study 1) ヘ テ の ロ quantity body 3 G protein beta サ ブ ユ ニ ッ ト と presumption さ れ る cDNA を イ ネ よ り 単 from し た. <s:1> cDNAを is synthesized with を て and fusion protein を to form <s:1> た, and then specific antibody を is modulated to た た. The <s:1> antibody と anti応 する product (43kDa) 応する and the protoplasmal membrane に are localized at <s:1> て た た た. 2) 単 YiZuo years from し た alpha サ ブ ユ ニ ッ ト の cDNA を い, fusion protein を modulation し た, そ の enzyme function の 検 line for を っ た. Alpha サ ブ ユ ニ ッ ト fusion protein は, GTPase お よ び GTP binding energy gamma S made を し, コ レ ラ toxin に よ る ADP リ ボ シ ル change を by け た. In the presence of <s:1> <s:1> ADPリボシ, で ネ ネ, <s:1> ロソ, ロソ, ロソ and ム, で are multiplied by tens of times by <s:1> た. ま た, こ の alpha サ ブ ユ ニ ッ ト に す seaborne る specific antibodies が base, plasma membrane の 45 kda ポ リ ペ プ チ ド を specific に know す る こ と を Ming ら か に し た. マ ス ト パ ラ ン を with い た higher plant prototype function of plasma membrane G protein の に masato す る research ヘ テ ロ quantity body 3 G protein の activeness tonic で あ る マ ス ト パ ラ ン を base, plasma membrane draw points, individual お よ び culture cell に cast with し て の know of these を た. a) The protoplasmic membrane of higher plants shows <s:1> GTPase activity およびGTPγS binding energy を increases させた. b) Molecular weight, 45kDa <s:1> protein kinase <e:1>, its own リ <s:1> acidification energy を increases by <s:1> た. c)phenylalanine ammonia-lyase (PAL) has 伝 offspring 転 written product が increased た. phospholipase A2, phospholipase C, phospholipase D, カ ル シ ウ ム チ ャ ン ネ ル, カ リ ウ ム チ ャ ン ネ ル の activity such as お よ び H_2O_2 の 発 raw な ど に, amount of 3 G protein が masato and す る こ と が in stopping さ れ て い る の で, in the future, こ れ ら の activity - move に マ ス ト パ ラ ン が masato and す る か no か を project し て い る.

项目成果

Iwasaki, Y. et al.: "Structure and function of putative heterotrimeric G proteins in higher plants. Ed. by S. G. Pandalai, In Resent Research Developments in Agricultural and Biological Chemistry." Research Signpost Pubulisher (in press),

Iwasaki, Y. 等人：“高等植物中假定的异三聚体 G 蛋白的结构和功能。S. G. Pandalai 编辑，农业和生物化学的最新研究进展。”

Ishikawa, A. et al.: "Molecular cloning and characterization of a cDNA for the β subunit of a G protein from rice." Plant Cell Physiol.37 (2). 223-228 (1996)

Ishikawa, A. 等人：“水稻 G 蛋白 β 亚基 cDNA 的分子克隆和表征。植物细胞生理学”37 (2) (1996)。

Iwasaki, Y. et al.: "Characterization of the putative α subunit of a heterotrimeric G protein in rice." Plant Mol. Biol.(in press).

Iwasaki, Y. 等人：“水稻中异源三聚体 G 蛋白的假定 α 亚基的表征”（植物分子生物学）。