再生胸腺微小環境によるT細胞の誘導　　―γδT細胞の産生と悪性腫瘍への応用―

再生胸腺微环境诱导T细胞-γδT细胞的产生及其在恶性肿瘤中的应用-

• 批准号: 21K06977
• 负责人: 保坂 直樹
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kansai Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K06977/
• 关键词: 胸腺; γδT細胞; 再生

本研究課題ではin vitroにてマウス人工性多能性幹細胞（induced pluripotent stem cells, iPSC）から胸腺上皮細胞(thymic epithelial cells, TEC)を誘導し、胸腺微小環境を構築の下、非iPS細胞由来の造血幹細胞(hematopoietic stem cells: HSC)との共培養によりγδT細胞の誘導を試みるものである。これらのγδT細胞は腫瘍化への危険が低く、治療への応用が期待できる。本課題では特に抗腫瘍効果について調べる。方法として、まずiPSCに適宜Activin A, Fibroblast growth factor(FGF)7, FGF8, FGF10, bone morphogenetic protein (BMP) 4を加え、内中胚葉及び胚体内胚葉を経由してTECを誘導させる。次に骨髄細胞(bone marrow cells:BMC)における単核球からlineage marker陽性細胞をmagnetic beads法にて除去し、HSCとして精製する(HSC-eBMC)。これらのTECとHSC-eBMCをサイトカインの存在下に相互作用させると、γδT細胞が誘導された。副作用を調べる為に自家骨髄移植したマウスに投与したが、明らかな自己免疫疾患や腫瘍の発生は見られず長期に生存した。また担白血病腫瘍マウスに投与すると、腫瘍の抑制とともに延命効果が得られた(J Cell Mol Med. 25: 10604, 2021)。次にin vitroにて、PD-L1発現腫瘍細胞への抗腫瘍効果を調べた。誘導γδT細胞との共培養にて、PD-1抗体投与郡と非投与群とを比較した所、前者ではγδT細胞の割合が増え、かつ腫瘍細胞の割合が減る傾向にあった。またこれらの実験で使用するiPSCを肝細胞由来のものに変えても、同様のγδT細胞の誘導が見られた。

The research topic of this study is で ら in vitroにて ウス ウス induced pluripotent stem cells (iPSC) ら thymic epithelial cells TEC)を induced みる, thymus microenvironment を constructed <s:1>, non-ips cell-derived <s:1> hematopoietic stem cells: HSC と <s:1> co-cultured によ <s:1> γδT cells <s:1> induced を test みる みる <s:1> である である である である である である は こ れ ら の gamma delta T cells swollen sores change へ の dangerous 険 が low く, treatment へ の 応 with が expect で き る. The special anti-swelling effect of this subject, で で, に, に,, て, べる. Methods と て て, まずiPSCに appropriate Activin A, Fibroblast growth factor(FGF)7, FGF8, FGF10 bone morphogenetic protein (BMP) 4を plus え, endoblastoderm and び endoblastoderm を are induced させる by を てTECを. Subに bone marrow cells (BMC)における単 nuclear spheres ら らlineage marker positive cells をmagnetic beads にて removal of <s:1>, HSCと て て refinement of する(hsc-eBMC). <s:1> れら れら TECとHSC-eBMCをサ トカ トカ <e:1> <s:1> に interaction させると, γδT cell が induction された. Side effects を adjustable べ る for に their bone marrow transplant し た マ ウ ス に cast with し た が, Ming ら か な himself immune disorders や swollen sores の 発 raw は see ら れ ず に long-term survival し た. ま た bear leukemia swollen sores マ ウ ス に cast with す る と, swollen sores の suppression と と も に life fruit comes unseen が ら れ た (J Cell Mol Med. 25, 10604, 2021). Then にin vitroにて PD-L1 abscess cells へ anti-abscess effect を regulation べた. Induced by gamma delta T cells と の trained に て, PD - 1 antibodies with county と shots and group of と を compare し た, by the former で は gamma delta T cells の cut close が raised え, か つ swollen sores cells の cut close が る reduction tendency に あ っ た. ま た こ れ ら の be 験 use で す る iPSC を liver cell origin の も の に - え て も, with others in の の gamma delta T cells induced が see ら れ た.

项目成果

骨髄細胞からのγδT細胞の産生 -iPS細胞由来胸腺上皮細胞を用いて-

从骨髓细胞生产 γδT 细胞 - 使用 iPS 细胞来源的胸腺上皮细胞 -

• 发表时间: 2022
• 作者: 中野なおこ;伊東史子;渡邊幸秀;武藤誠;加藤光保;伊東進;保坂直樹 神田靖士 下埜敬紀 西山利正
• 通讯作者: 保坂直樹 神田靖士 下埜敬紀 西山利正