組換え麻疹ウイルス抗腫瘍療法における樹状細胞を利用した特異的腫瘍免疫確立法の開発

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申請者らはこれまでに、麻疹ウイルス野外株に対して免疫細胞受容体（SLAM）への結合能を欠失するアミノ酸変異（SLAMblind変異）を導入した組換え麻疹ウイルス（SLAMblindウイルス）を作出し、このウイルスが腫瘍細胞で高発現するnectin-4を介して腫瘍細胞に効率よく感染し増殖することで強い腫瘍溶解能を発揮することを証明してきた。さらに、マウス腫瘍細胞株でもヒトnectin-4を発現させるとSLAMblindウイルスが効率よく感染して細胞を殺し、免疫保有マウスへ移植したin vivo担癌モデル系でも腫瘍増大を抑制することを明らかにした。これらの知見を元に、本研究課題では、樹状細胞を介した特異的腫瘍免疫活性を増強することで、SLAMblindウイルスの抗腫瘍効果を最大限に引き出すことを目標とした。本年度は以下の3項目を中心に本研究課題を遂行した。1) 樹状細胞に麻疹ウイルスワクチン株を感染させることで樹状細胞を介した抗麻疹ウイルス免疫が確立され、それによりSLAMblindウイルスが感染した腫瘍細胞に対する抗腫瘍免疫も増強されると考えられる。そこでワクチン株に感受性のマウス樹状細胞株の樹立法の検討を行った。2) T細胞等から産生されるFlt3L分子が樹状細胞の誘引活性をもつことが報告されている。そこで組換えウイルス作出技術（リバースジェネティクス）を利用し、SLAMblindウイルスゲノム内にFlt3L遺伝子を搭載した組換えウイルスの作出を行った。3) in vivoでのマウス免疫応答の評価系を確立するために、ヒトnectin-4を恒常発現するマウス腫瘍細胞株を複数作製し、in vitroでのSLAMblindウイルスの感染効率や殺細胞能などを測定すると同時に、免疫保有マウスへ移植してSLAMblindウイルスのin vivoでの抗腫瘍活性を評価した。