組換え麻疹ウイルス抗腫瘍療法における樹状細胞を利用した特異的腫瘍免疫確立法の開発

开发在重组麻疹病毒抗肿瘤治疗中使用树突状细胞建立特异性肿瘤免疫的方法

• 批准号: 21K07190
• 负责人: 佐藤 宏樹
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K07190/
• 关键词: 麻疹ウイルス; 腫瘍溶解性ウイルス; 樹状細胞; 抗腫瘍免疫; 腫瘍免疫

申請者らはこれまでに、麻疹ウイルス野外株に対して免疫細胞受容体（SLAM）への結合能を欠失するアミノ酸変異（SLAMblind変異）を導入した組換え麻疹ウイルス（SLAMblindウイルス）を作出し、このウイルスが腫瘍細胞で高発現するnectin-4を介して腫瘍細胞に効率よく感染し増殖することで強い腫瘍溶解能を発揮することを証明してきた。さらに、マウス腫瘍細胞株でもヒトnectin-4を発現させるとSLAMblindウイルスが効率よく感染して細胞を殺し、免疫保有マウスへ移植したin vivo担癌モデル系でも腫瘍増大を抑制することを明らかにした。これらの知見を元に、本研究課題では、樹状細胞を介した特異的腫瘍免疫活性を増強することで、SLAMblindウイルスの抗腫瘍効果を最大限に引き出すことを目標とした。本年度は以下の3項目を中心に本研究課題を遂行した。1) 樹状細胞に麻疹ウイルスワクチン株を感染させることで樹状細胞を介した抗麻疹ウイルス免疫が確立され、それによりSLAMblindウイルスが感染した腫瘍細胞に対する抗腫瘍免疫も増強されると考えられる。そこでワクチン株に感受性のマウス樹状細胞株の樹立法の検討を行った。2) T細胞等から産生されるFlt3L分子が樹状細胞の誘引活性をもつことが報告されている。そこで組換えウイルス作出技術（リバースジェネティクス）を利用し、SLAMblindウイルスゲノム内にFlt3L遺伝子を搭載した組換えウイルスの作出を行った。3) in vivoでのマウス免疫応答の評価系を確立するために、ヒトnectin-4を恒常発現するマウス腫瘍細胞株を複数作製し、in vitroでのSLAMblindウイルスの感染効率や殺細胞能などを測定すると同時に、免疫保有マウスへ移植してSLAMblindウイルスのin vivoでの抗腫瘍活性を評価した。

The applicant has demonstrated that there is a lack of binding energy (SLAMblind difference) in SLAM cells in the wild, and that there is a lack of binding energy (SLAMblind difference) in SLAM cells in the wild. The expression of nectin-4 in tumor cell lines was inhibited by SLAMblind, and the rate of infection was increased by cell transplantation. The aim of this study is to increase the tumor-specific immune activity of dendritic cells and to maximize the anti-tumor effect. This year, the following three projects were carried out. 1)Dendritic cells are responsible for establishing immunity against measles and for enhancing immunity against tumor cells. A Study on the Establishment of Dendritic Cell Lines with Susceptibility to Plant Growth 2)T cells and the like are produced in the presence of Flt3L molecules and dendritic cells are induced to activate the cells. The technology of making a switch is used, and SLAMblind is used to make a switch. 3)The evaluation system of immune response in vivo was established, nectin-4 was constantly present, tumor cell lines were repeatedly produced, the infection rate and cytotoxicity of SLAMblind cells in vitro were determined, and the anti-tumor activity of SLAMblind cells in vivo was evaluated.

项目成果

Nonclinical safety study of a recombinant SLAM-blind measles virus for cancer therapy

重组 SLAM 盲麻疹病毒用于癌症治疗的非临床安全性研究

• 发表时间: 2021
• 作者: Hiroki Sato;Tomoko Fujiyuki;Misako Yoneda;Chieko Kai.
• 通讯作者: Chieko Kai.