Proteases in itch accompanied by bullous pemphigoid

類天疱瘡の痒みは既存の治療に抵抗性を示し臨床上の問題となる。その痒みにはヒスタミン以外の起痒物質の関与が示唆されるが具体的な分子はまだ特定されていない。その起痒物質の同定のため、申請者らは、類天疱瘡において増加しているプロテアーゼがPAR-2活性化を介して痒みを引き起こすと仮説を立て、研究を開始した。2022年度までは、プロテアーゼの中でもグランザイムKに特に集中して研究を進めた。2022年度は2021年度に引き続き、摘出したマウス培養後根神経節細胞にFluo-8(R) AMを取り込ませ、グランザイムKで刺激直後にその細胞内のCa2+流入があるかどうかをライブセルイメージングの手法で観察した。PAR-2 agonistであるSLIGRLで刺激した際にCa2+流入があった細胞に、グランザイムK刺激でもCa2+流入が認められた。このことから、我々はグランザイムKがPAR-2を介してCa2+流入を引き起こしている可能性が高いと考えている。今後阻害実験を行う予定である。また、患者皮疹部のグランザイムKが感覚神経終末の近傍に局在するかどうかを確認するため、PGP9.5とグランザイムKの二重染色を行った。現在のところ、尋常性乾癬において感覚神経の近傍にグランザイムK陽性細胞が局在することを確認している。今後類天疱瘡疾患でも確認予定である

類天疱瘡の痒みは既存の治療に抵抗性を示し臨床上の問題となる。その痒みにはヒスタミン以外の起痒物質の関与が示唆されるが具体的な分子はまだ特定されていない。その起痒物質の同定のため、申請者らは、類天疱瘡において増加しているプロテアーゼがPAR-2活性化を介して痒みを引き起こすと仮説を立て、研究を開始した。2022年度までは、プロテアーゼの中でもグランザイムKに特に集中して研究を進めた。2022年度は2021年度に引き続き、摘出したマウス培養後根神経節細胞にFluo-8(R) AMを取り込ませ、グランザイムKで刺激直後にその細胞内のCa2+流入があるかどうかをライブセルイメージングの手法で観察した。PAR-2 agonistであるSLIGRLで刺激した際にCa2+流入があった細胞に、グランザイムK刺激でもCa2+流入が認められた。このことから、我々はグランザイムKがPAR-2を介してCa2+流入を引き起こしている可能性が高いと考えている。今後阻害実験を行う予定である。また、患者皮疹部のグランザイムKが感覚神経終末の近傍に局在するかどうかを確認するため、PGP9.5とグランザイムKの二重染色を行った。現在のところ、尋常性乾癬において感覚神経の近傍にグランザイムK陽性細胞が局在することを確認している。今後類天疱瘡疾患でも確認予定である