Development of a new rapid diagnostic method and early phase pathology analysis in coagulation fibrinolysis disorders

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救命救急分野で、患者の凝固および線溶機能評価は重要である。近年、APTTによる凝固波形解析（CWA）と、それを改変した凝固線溶波形解析（CFWA）が確立された。CFWAは自動凝固分析装置を用いて実施でき、APTTを測定するCaCl2添加時に組織プラスミノーゲンアクチベータを微量添加することで、凝固からおこるフィブリン溶解反応をリアルタイムに観察できる。また、パラメータによる定量的解析が可能である。我々は、凝固波形解析(CWA)の一次微分曲線から、2種類のAPTT試薬を用いて一次微分曲線と凝固因子活性の関係を調べたところ、自動凝固分析装置のCWAで得られた補正最大凝固速度のAd_|min1|は、2試薬いずれもVIII,IX因子活性1％未満検体の約9割を捉えることができた。しかし、試薬特性が異なるため、試薬毎のCut off値設定が必要であることを報告した。我々は、Fibrinogen（Fib）によるCFWAへの影響は明らかでないため、血友病A血漿にFibを添加することで、凝固・線溶能におけるFibの影響について検証した。Fib量が増加したFVIII低濃度域の血友病A症例では、フィブリン溶解の上昇による線溶が早まることを明らかにした。一方、凝固線溶波形におけるフィブリン溶解能の解析について、装置外で各反応時間のサンプルを作成し、Immuno blotを用いてFDPの各分画を解析した。出血症状の重篤な血友病血漿では、早期の段階よりDD分画が出現した。これは凝固反応とフィブリン溶解反応が同時に起こっているためと考えられた。CFWAで血友病AのFVIII低下による凝固機能の低下のみならず線溶の早期開始による出血症状を反映していると考えられた。我々は、CWAやCFWAを活用し、迅速で汎用性の高い凝固線溶機能評価方法を広めたい。