The analysis focusing on ovarian granulosa cells from reproductive medicine to gynecological tumors

从生殖医学到妇科肿瘤聚焦卵巢颗粒细胞解析

基本信息

批准号：
21K09505
负责人：
下屋浩一郎
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Kawasaki Medical School
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

生殖領域における解析：低刺激周期体外受精における採卵時の卵胞液におけるサイトカインと胚盤胞発生率および卵の質との関連を網羅的に解析し、IL-1RA、IL-4、IL-17Aが抽出された。さらに解析を進め、血中のIL-17A濃度が体外受精胚移植の際の卵の質と相関し、有意なマーカーとなりうることが明らかとなり、その結果をもとに男性側におけるこれらの因子の関与について解析する目的で体外受精時の精漿中のこれらサイトカイン濃度と予後について解析を遂行中である。婦人科腫瘍領域における解析：顆粒膜細胞腫（GCT）細胞株（KGNおよびCOV434）に対するヒストン脱アセチル化酵素阻害剤panobinostat（PS）のin vitro効果を検討した。GCT細胞株はPS処理に感受性が高く、主にアポトーシスによって細胞増殖を抑制した。細胞周期解析では、S期の比率のみを低下させた。PSと脱ユビキチン化酵素阻害剤であるVLX1570を併用すると、p21、cleaved PARP、cleaved caspase-9、heme oxygenase-1の発現、ヒストンH4とα-tubulinのアセチル化を促進し、KGNとCOV434に対して相加的に抗増殖作用が見られた。PS処理により、化学療法による細胞死を引き起こすDNA複製や細胞周期に関連する遺伝子発現が抑制され、KGN細胞ではHDAC阻害剤によるエピジェネティック修飾により予想外の分化能を示す可能性が示された。また、KGN細胞およびCOV434細胞をPSに曝露すると、定量的RT-PCRおよび免疫ブロッティング解析において、アドヘレンス接合に関連する主要な制御因子の一つであるE-カドヘリンの発現が増加した。本結果はHDAC阻害剤を用いたGCTの新規治療法の可能性を示すものであった。

生殖区域的分析：在体外受精和卵子质量的卵子检索时，细胞因子在卵泡液中的细胞因子之间的关联得到了全面的分析，并提取了IL-1RA，IL-4和IL-17a。已经进行了进一步的分析，并且已经表明，血液中IL-17a的浓度与体外受精的胚胎转移期间与卵质量相关，并且可以是一个显着的标记，并且基于结果，我们目前正在分析体外肥料和预测期间这些细胞因子的浓度。妇科肿瘤区域中的分析：我们研究了组蛋白脱乙酰基酶抑制剂泛抑制剂（PS）对颗粒细胞系（GCT）（KGN和COV434）的体外效应。 GCT细胞系对PS治疗高度敏感，主要通过细胞凋亡抑制细胞增殖。细胞周期分析仅降低了S相比。当使用PS和去泛素酶抑制剂VLX1570结合使用时，它促进了p21的表达，裂解PARP，裂解的caspase-9和血红素加氧酶-1，以及组蛋白H4和α-微蛋白的乙酰基化，以及对KGN和COVV434的乙蛋白H4和α-纤维蛋白，以及表现出对KGN和COVV434的表现。 PS处理抑制DNA复制和与细胞周期相关的基因表达，导致由于化学疗法引起的细胞死亡，并且已经表明，由于与HDAC抑制剂的表观遗传修饰，KGN细胞可能具有意外的分化潜力。另外，在定量RT-PCR和免疫印迹分析中，KGN和COV434细胞暴露于PS PS增加了E-钙粘蛋白的表达，这是与依从性连接相关的主要调节剂之一。结果证明了使用HDAC抑制剂对GCT进行新的治疗的潜力。

项目成果

期刊论文数量（3）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Histone deacetylase inhibitor, panobinostat, exerts anti-proliferative effect with partial normalization from aberrant epigenetic states on granulosa cell tumor cell lines.

DOI：
10.1371/journal.pone.0271245
发表时间：
2022
期刊：
PLOS ONE
影响因子：
3.7
作者：
Hazama, Yukiko;Tsujioka, Takayuki;Kitanaka, Akira;Tohyama, Kaoru;Shimoya, Koichiro
通讯作者：
Shimoya, Koichiro

Comprehensive analysis of cytokines in the follicular fluid and serum during in vitro fertilization and embryo transfer

体外受精和胚胎移植过程中卵泡液和血清中细胞因子的综合分析

DOI：
10.11482/kmj-e202147167
发表时间：
2021
期刊：
Kawasaki Medical Journal
影响因子：
0
作者：
Keiko MATSUMOTO;Takehiko MATSUYAMA;Shin OHIRA;Rumi NAKAZAWA;Yukiko HAZAMA;Takuya MORIYA;Ryo MATSUMOTO;Takafumi NAKAMURA;Koichiro SHIMOYA
通讯作者：
Koichiro SHIMOYA

体外受精における卵胞液中のサイトカインの網羅的解析

体外受精过程中卵泡液细胞因子的综合分析