SARS-CoV2偽型レンチウィルスによる鼻腔感染阻害薬のスクリーニング

SARS-CoV2假型慢病毒鼻腔感染抑制剂的筛选

• 批准号: 21K09617
• 负责人: 大江 洋子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Juntendo University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09617/
• 关键词: SARS-Cov2; レンチウィルス; ギャップ結合複合体; 薬剤選抜法; 新型コロナウイルスSARS-CoV2; 鼻腔感染阻害薬; レンチウイルス

COVID19の初期症状に見られるように、経鼻感染が特徴的なウィルス感染症への治療法開発では鼻粘膜上皮細胞や鼻粘膜組織を用いたin vitro感染阻止能の評価実験が有効となる。本研究ではBSL2の範囲内で治療薬開発ができるレンチウィルスにSARS-Cov2等のウィルスの単一スパイクタンパク質（S-protein等）のみをエンベロープに置換することにより、BSL2レベルのin vitro感染実験で新興再興感染症の感染を阻止する治療薬を開発することを目的とする。これまで武漢型（Lenti-Cov2-S-GFP）とベンベロープSタンパク質にD614G変異を持つ欧州型（Lenti-Cov2-S-D614G-GFP）を作成した。SARS-Cov2偽型レンチウイルスは緑色蛍光タンパク質を発現し、SARS-Cov2の疑似エンベロープとしてSARS-Cov2 S-Protein（武漢型とD614G変異を持つ欧州型）を有する、対象群として通常用いられるVSVGをエンベロープに持つレンチウィルス（Lenti-VSVG）を用い一般的なレンチウィルスへの感染との相違を求めることによりCOVID19特有の感染阻害効果を示す薬剤を選抜した。これまでの研究では、あるペプチド分子の存在の有無下でのヒト上皮細胞におけるLenti-CoV2-S-GFPの感染についての評価を行った。ヒト上皮細胞をSARS-CoV-2-S疑型GFPレンチウイルス（Lenti-CoV2-S-GFP）に感染させ（MOI＝100）、コントロール、該当ペプチドの分子種（各10 μg/mL）で24h刺激した。その結果、同細胞へのレンチウイルスの感染を確認した。対照的に他の分子種3種では効果を見られなかった。この結果から、同ペプチド分子種がSARS-CoV-2による感染を抑制する可能性が示唆された。

The initial symptoms of COVID-19 were identified and the characteristics of nasal infections were identified. Treatment of nasal infections was developed using vitro infection prevention techniques. This study aims to develop therapeutic agents for BSL2 in vitro infection prevention and treatment of emerging re-emerging infections, including SARS-Cov2 and other single substance substitutions (S-protein). The Wuhan type (Lenti-Cov2-S-GFP) is different from the European type (Lenti-Cov2-S-D614G-GFP). SARS-Cov2 S-Protein: SARS-Cov2 Pseudo-type, SARS-Cov2 Pseudo-type (Wuhan type and D614G variant) There are many kinds of target groups, such as VSVG, Lenti-VSVG, and so on. This study was conducted to evaluate the presence and absence of Lenti-CoV2-S-GFP in human epithelial cells. Epithelial cells were infected with SARS-CoV-2-S-GFP (Lenti-CoV-2-S-GFP) at MOI=100, and stimulated with the same molecular species (10 μg/mL each) for 24h. The results of the study confirmed that the infection was caused by the same cell line. 3 species of other molecular species were identified. The results showed that SARS-CoV-2 infection was inhibited by the same molecular species.

项目成果

Generation of two iPSC lines from siblings of a homozygous patient with hearing loss and a heterozygous carrier with normal hearing carrying p.G45E/Y136X mutation in GJB2

从患有听力损失的纯合子患者和携带 GJB2 p.G45E/Y136X 突变的听力正常的杂合子携带者的兄弟姐妹中生成两个 iPSC 系

• DOI: 10.1016/j.scr.2021.102290
• 发表时间: 2021
• 期刊: Stem Cell Research
• 影响因子: 1.2
• 作者: Fukunaga Ichiro;Oe Yoko;Danzaki Keiko;Ohta Sayaka;Chen Cheng;Iizumi Madoka;Shiga Takahiro;Matsuoka Rina;Anzai Takashi;Hibiya-Motegi Remi;Tajima Shori;Ikeda Katsuhisa;Akamatsu Wado;Kamiya Kazusaku
• 通讯作者: Kamiya Kazusaku

Modeling Gap junction beta 2 gene-related deafness with human iPS

使用人类 iPS 模拟间隙连接 beta 2 基因相关性耳聋

• DOI: 10.1093/hmg/ddab097
• 发表时间: 2021
• 期刊: Human Molecular Genetics
• 影响因子: 3.5
• 作者: Ichiro Fukunaga;Yoko Oe;Keiko Danzaki;Sayaka Ohta;Cheng Chen;Kyoko Shirai;Atsushi Kawano;Katsuhisa Ikeda;Kazusaku Kamiya
• 通讯作者: Kazusaku Kamiya