甲状腺高分化癌の未分化形質獲得機構の解明及び新規バイオマーカーの検討

阐明高分化甲状腺癌未分化性状的获得机制及新生物标志物的研究

基本信息

批准号：
21K09632
负责人：
稲瀬安希
金额：
$ 2.75万
依托单位：
Kobe University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K09632/
关键词：
甲状腺癌未分化癌脱分化上皮間葉転換バイオマーカー

项目摘要

甲状腺高分化癌は非常に予後良好であるのに対し、未分化癌は罹患率が2％未満、1年生存率は5-20％以下の極めて予後不良なorphan diseaseである。高分化癌から脱分化して生じると考えられているが、その機序は不明である。本研究では「高分化癌が未分化形質を獲得する機序の解明」を目的とし、同一腫瘍検体の高分化部位と未分化部位の遺伝子発現の網羅的解析、細胞株を用いた未分化形質獲得解析により、脱分化を誘導する遺伝子を明確にする。前年度は高分化癌（乳頭癌）から未分化転化した患者検体（FFPE）を用いて、高分化部位と未分化部位の遺伝子発現解析（RNA-seq)を行い、未分化形質獲得の機序に関わる可能性が高い因子として、EMT関連遺伝子X（EMT-X）に着目した。甲状腺未分化癌細胞株（OCUT-1F, OCUT-1C, OCUT-2)を用いてsiRNAによるEMT-Xの発現抑制を行ったところ、その形態が大きく変化することを見いだした。この形態変化はEMTとは逆向きの方向に誘導している可能性を示唆していた。2年目の本年度はEMT-Xの甲状腺がんにおける機能解析を行った。その結果、EMT-Xの発現がTGF-bによって誘導されてくること、EMT関連転写因子SNAI1やSNAI2と協調的に働く可能性を見出した。より詳細に解析を行うため、CRISPR/Cas9ゲノム編集技術によるEMT-Xのノックアウト/ノックイン細胞を作製している。

高度分化的甲状腺癌的预后很好，而未分化的癌症患有极差的孤儿疾病，发病率小于2％，一年生存率小于5-20％。人们认为它是由分化良好的癌症的去分化引起的，但是这种机制尚不清楚。这项研究的目的是“阐明高度分化的癌症获得未分化的特征的机制”，并阐明通过对同一肿瘤标本的良好分化和未分化的位点上的基因表达进行全面分析来诱导去分化的基因，还可以分析细胞的不体分析性特性。在上一年中，使用患者标本（FFPE）对良好差异和未分化的位点进行了基因表达分析（RNA-SEQ），这些样本（FFPE）与良好分化的癌症（乳头状癌）未分化，并侧重于EMT相关基因X（EMT-X）的因素涉及的机构，并涉及EMT与EMT相关的基因X（EMT-X）。当siRNA使用未分化的甲状腺癌细胞系（OCUT-1F，OCUT-1C，OCUT-2）抑制EMT-X的表达时，发现形态发生了显着改变。这种形态学的变化表明，它可以朝与EMT相反的方向诱导。今年，第二年，我们在甲状腺癌中对EMT-X进行了功能分析。结果，我们发现EMT-X表达是由TGF-B诱导的，并且有可能与EMT相关的转录因子SNAI1和SNAI2合作。为了进行更详细的分析，使用CRISPR/CAS9基因组编辑技术生产EMT-X敲除/敲除细胞。