Multimodal imaging analysis of oral cancer cells focused on lysosomes

以溶酶体为重点的口腔癌细胞多模态成像分析

• 批准号: 21K10047
• 负责人: 角 忠輝
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagasaki University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21K10047/
• 关键词: リソソーム; 口腔癌細胞; マルチモーダルイメージング; カテプシンK

癌細胞が浸潤と転移を起こすのは、リソソームが細胞外へ分泌される事と深い相関がある。近年、我々はリソソーム性タンパク質の発現レベルを抑制すると浸潤と転移が低下する事を示した。そこで本研究では、口腔癌においてリソソームがどのように細胞や生体の機能に影響を与えるかを様々なイメージングを用いて明らかにする。複数の方法を組み合わせて行うことでリソソームからの分泌がいつ、どのように起こるのかを分子から細胞、さらに個体レベルへとマクロからミクロレベルの解析を行う。本研究は不明な点が多く残されていたリソソームによる癌細胞の浸潤と転移について種々のイメージング解析を用いて解明する。昨年度および本年度は以下のような実験を行った。１）リソソーム遺伝子変異扁平上皮癌における浸潤能の変化：口腔扁平癌細胞株であるHSC2、 HSC3、HSC4、 OSC20、 SAS、Ca9-22の6種類に対して、カテプシンKの定量とカテプシンKノックダウン細胞の確立した。２）カテプシンK阻害薬での扁平上皮癌における浸潤能の変化：口腔扁平癌細胞株6種類でのカテプシンK阻害剤であるOdanacatibを用いてコントロールと阻害薬投与細胞と比較し、浸潤能はMatrigel invasion chamberを使用して測定した。またリソソーム性プロテアーゼをどの程度分泌しているのか、カテプシン群の基質を用いて活性を測定した。２）カテプシンK過剰発現細胞での扁平上皮癌における浸潤能の変化：口腔扁平癌細胞株6種類でのカテプシンK-過剰発現細胞を正常細胞と比較し、浸潤能はMatrigel invasion chamberを使用して測定した。またリソソーム性プロテアーゼをどの程度分泌しているのか、カテプシン群の基質を用いて活性を測定した。４）癌細胞でのリソソーム分泌機構：共焦点顕微鏡を用いて上記の口腔扁平癌細胞株にカテプシンKをラベルして浸潤能との一致を検討した。

Cancer cell invasion and metastasis are closely related to extracellular secretion. In recent years, we have been able to improve the quality of the development of the environment and reduce the infiltration and migration of the environment. This study is aimed at improving the function of oral cancer cells. The method of multiple groups is composed of the following: the secretion of the molecule, the analysis of the molecule, the analysis of the individual. This study is aimed at clarifying the role of multi-agent systems in cancer cell invasion and migration. Last year, the following year, 1) Expression of invasion ability in different squamous cell carcinomas: 6 types of oral squamous cell carcinoma cell lines: HSC2, HSC3, HSC4, OSC20, SAS, Ca9 -22. 2) Changes of invasion ability in squamous cell carcinoma: Odanacatib was used in 6 kinds of oral squamous cell carcinoma cell lines to compare the invasion ability with Matrigel invasion chamber. To determine the activity of the matrix in the secretion of protein and protein 2) Expression of invasion ability in squamous cell carcinoma: 6 types of oral squamous cell carcinoma cell lines were compared with normal cells. Expression of invasion ability was measured by Matrigel invasion chamber. To determine the activity of the matrix in the secretion of protein and protein 4) The secretion mechanism of cancer cells: confocal microscopy was used to record the secretion mechanism of oral flat cancer cells.

项目成果

Rab34 plays a critical role as a bidirectional regulator of osteoclastogenesis

• DOI: 10.1002/cbf.3691
• 发表时间: 2022-03
• 期刊: Cell Biochemistry and Function
• 影响因子: 3.6
• 作者: Yunxia Feng;M. T. Tran;Yanyin Lu;Kaung Htike;Yuka Okusha;C. Sogawa;T. Eguchi;T. Kadowaki;E. Sakai;T. Tsukuba;K. Okamoto

高分子量Rabタンパク質が制御する筋芽細胞から筋管への分化機構

高分子量Rab蛋白调控成肌细胞分化为肌管的机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 谷本 あゆ子，山口 優，門脇 知子，親川 駿;坂井 詠子，小野 悠介， 吉田 教明，筑波 隆幸
• 通讯作者: 坂井 詠子，小野 悠介， 吉田 教明，筑波 隆幸

Rab44 isoforms similarly promote lysosomal exocytosis, but exhibit differential localization in mast cells.

• DOI: 10.1002/2211-5463.13133
• 发表时间: 2021-04
• 期刊: FEBS open bio
• 影响因子: 2.6
• 作者: Kadowaki T;Yamaguchi Y;Ogawa K;Tokuhisa M;Okamoto K;Tsukuba T
• 通讯作者: Tsukuba T

Rab44タンパク質による炎症応答制御機構

Rab44蛋白的炎症反应控制机制

• 发表时间: 2022
• 作者: 門脇知子;山口 優;佐藤啓子;筑波隆幸
• 通讯作者: 筑波隆幸

Rufy4はRUNドメインを介して破骨細胞による骨吸収を制御する

Rufy4 通过其 RUN 结构域控制破骨细胞的骨吸收

• 发表时间: 2022
• 作者: 坂井 詠子;Farhana Fatima;小栁 悠;山口 優，筑波 隆幸
• 通讯作者: 山口 優，筑波 隆幸