The elucidation of expression mechanism and biological functions of a novel biomarker for diffuse alveolar damage

阐明弥漫性肺泡损伤的新型生物标志物的表达机制和生物学功能

• 批准号: 20K07366
• 负责人: 荒川 憲昭
• 金额: $ 2.83万
• 依托单位: National Institute of Health Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-04-01 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K07366/
• 关键词: びまん性肺胞傷害; DAD; 薬剤性間質性肺炎; 肺胞上皮細胞; Stratifin; 間質性肺炎; バイオマーカー; 血液検査

間質性肺炎の病型の中で、びまん性肺胞傷害（DAD）は特に予後がわるい。我々は、Stratifin(SFN)が、DADの新しい血液診断マーカーとなる可能性を見いだしたが、SFNは肺における役割や機能について未解明な部分が多く、びまん性肺胞傷害との関連性も不明である。そこで本年度は、肺由来の細胞がSFNを発現する可能性があるのかどうか検討するために、種々の培養細胞を用いてSFNの発現解析を行った。SFNタンパク質はウエスタンブロットおよびELISA法にて、遺伝子発現はリアルタイムＲＴ－ＰＣＲにより解析した。気管支上皮由来のHBEC-3KTやNuli-1細胞株、あるいはその初代培養系のHPAEpiC細胞では、細胞内および培養上清中におけるSFN発現量は基礎レベルから高かったが、これらに比べて、II型肺胞上皮由来のA549細胞や肺線維芽細胞の初代培養系ＮＨＬＦやＤＨＬＦでは、SFN発現量は低かった。また、A549やおよび肺線維芽細胞では、血小板由来増殖因子（PDGF）やTGF-β1で刺激を行っても、SFNの発現には変化は見られず、肺の線維化にはSFNは関与していない可能性が示唆された。しかし、A549細胞では、JNJ26854165やNutlin-3、ブレオマイシン、シスプラチンや過酸化水素等の処理により、転写因子p53の活性化が起きるとともに、SFN遺伝子の発現上昇が起き、細胞内よりもむしろ、培養上清中のSFNタンパク質量が著しく上昇した。これらの結果から、DADパターンを呈する間質性肺炎の患者の血中で増加するSFNの産生源の一つは、肺胞上皮である可能性があり、肺胞上皮では損傷を受けた際のp53活性化に伴いSFNが発現上昇し、細胞外（血中）へ放出される可能性が示された。

Pulmonary cytopathic injury (DAD) in the disease type of chronic pneumonia is particularly severe in the future. In our hospital, Stratifin (SFN), DAD, the possibility of blood damage, lung cancer, lung cancer This year, the cause of this year, the lung, the SFN, the possibility of this year, the lung, lung, SFN said that the ELISA method was not available and that the RT-PCR method was used to analyze the data. The origin of HBEC-3KT branch epithelium is HPAEpiC cell line, the primary culture line is HPAEpiC cell line, the supernatant of intracellular culture medium is SFN cell line, the cell line of type II lung cell is A549 cell line, the primary cell line is NHLF DHLF cell line, and the quantity of SFN cell is low. Lung cancer, A549 lung cancer, platelet progenitor factor (PDGF), TGF- β 1, SFN, lung cancer, lung cancer and lung cancer. Cell cycle, A549 cell cycle, JNJ26854165Nutlin-3, SFN cell cycle, acidified water and other pathogens, the writing factor p53, the activation factor p53, the current cycle, the intracellular enzyme, the supernatant, and the supernatant of the supernatant. The results showed that in patients with chronic pneumonia, the presence of SFN in the blood of patients with chronic pneumonia, the possibility of lung epithelial infection, the possibility of activation of p53 associated with SFN infection, and the possibility of extracellular (blood) release showed significant difference.