ＨＩＶによるＴ細胞機能不全を回復する抗ミリストイル基ダイアボディによる治療法開発

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“HIVはその遺伝子産物であるNefによって、本来は感染宿主細胞（Ｔ細胞）が使用している弱い相互作用に介在して効果的に細胞機能を停止している”、という申請者の研究に基づく仮説と、独自の抗体ライブラリー技術を用いて、NefがＴ細胞の機能を停止するのを阻止するダイアボディ(２重特異性抗体)を抗ミリストイル基抗体と抗Nef抗体を使って作製し、エイズ治療のための分子標的薬プロトタイプを開発する。令和４年度は、先に作成したダイアボディ(２重特異性抗体)の性能が低いことが分かったので、新たに前年度までに取得していた複数のクローンから、抗HIV-Nef抗体と、抗ミリストイル基抗体のそれぞれに関してより性能の高いものを選んだ（モノクローナル化）。本年度は、それらをリンカーで繋いでダイアボディ(２重特異性抗体)を作製し、改めてその性能を評価する。他方、抗体創薬で必要な、抗体への細胞移入能力を付与するために、ファージ粒子由来の細胞透過タンパク質を付与した新規機能性抗体を開発した。この機能部位を付与することで、接種されたダイアボディが標的細胞内に移入されて、病原分子の機能を阻害出来るようになる。昨年度は、この分子針を付与しても、抗体の機能が損なわれないことを確認した。今年度はその分子針を新たに作成したダイアボディに付与して、その細胞移入能を調べる。さらに、先に作成した、機能アッセイに使用する、抗原（HEV Nef）を発現しているJurkat細胞を用いて、今後は細胞へ分子針が付加された抗体を導入し、導入後に細胞内で抗原抗体反応を確認すると共に、病原体により失われた細胞機能（CD4のダウンレギュレーション）の回復を確認することが課題である。