脳特異タンパク質で新規に見出されたミリスチル化によるタンパク質間相互作用の制御

在大脑特异性蛋白质中新发现的肉豆蔻酰化调节蛋白质-蛋白质相互作用

基本信息

批准号：
13770064
负责人：
林宣宏
金额：
$ 1.09万
依托单位：
Fujita Health University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

脳に特異的に発現しているNAP22と細胞内シグナル伝達系の主要因子カルモジュリンとの相互作用がミリスチル化により制御される新規のタンパク質間相互作用であることを見い出し、その分子機構を^1H-NMR、溶液X線小角散乱、CD、蛍光スペクトルの実験データをもとにしたバイオインフォマティックスにより解析している。これまでにこの相互作用が、1)ミリスチル基依存的であること、2)リン酸化により抑制されること、3)モル比が2:1の複合体を形成すること、また、複合体形成時に、4)カルモジュリン結合部位が既知の複合体で見られるようなαヘリックスを形成していないこと、5)慣性半径が既知のそれよりも大きいこと、などを明らかにした。現在は、NAP22とカルモジュリンの相互作用が脳内におけるシグナル伝達系の制御にどのように関与しているのかに着目して研究を進めている。また、srcがん遺伝子産物とHIV nef遺伝子産物では実験的にミリスチル化が示されているが、両者に関してもNAP22と同様の機能制御が存在することを見い出し、その分子機構、および生理作用、特に細胞がん化とエイズの発症の分子機構の解明を念頭に、研究を進めている。さらに、ゲノムデータを用いたバイオインフォマティックスにより生体内でミリスチル化が予測されるタンパク質をリストアップし、実際にそれらのタンパク質がカルモジュリンと相互作用するかについての網羅的解析を開始した(Bioinformatics Group, Institute of Molecular Pathology(Austria)との共同研究)。

We discovered that the interaction between NAP22, which is specifically expressed in the brain, and calmodulin, the main factor of the intracellular signaling system, is a novel protein-protein interaction controlled by myristylation, and the molecular mechanisms are analyzed by bioinformatics based on experimental data such as ^1H-NMR, small-angle solution X-ray scattering, CD, and fluorescence spectra.到目前为止，这种相互作用已经表明1）是肉豆蔻酰依赖性的，2）受磷酸化的抑制，3）它形成一个复合物，摩尔比为2：1，而4）其钙调蛋白结合位点并未形成已知复合物中的α螺旋，并且比已知复合物的半径更大。目前，我们正在进行研究，重点是NAP22与钙调蛋白之间的相互作用如何参与大脑信号转导系统的调节。此外，在SRC癌基因产品和HIV NEF基因产物中已经通过实验证明了肉豆蔻酰化，但是我们发现，两者中都存在与NAP22相似的功能调节，并且正在牢记分子机制和生理效应，尤其是分子机制，尤其是分子机制，尤其是细胞碳碳碳碳碳碳碳碳碳碳碳碳的创造和艾滋病的发展。此外，使用基因组数据的生物信息学已用于列出预测在体内被肉豆蔻酰化的蛋白质，并且详尽的分析已经开始确定这些蛋白质是否实际上与钙调蛋白相互作用（与生物信息学组的协作，分子病理学研究所（outtia））。