Molekularbiologische und biochemische Charakterisierung pflanzlicher Hexokinasen in Tabak

烟草中植物己糖激酶的分子生物学和生化特征

基本信息

项目摘要

Die Hexokinase als ein zentrales Enzym im Kohlenhydratstoffwechsel ist möglicherweise Bestandteil eines Multiproteinkomplexes. Unsere Vorarbeiten haben gezeigt, dass mehrere Hexokinase-Isoformen mit unterschiedlicher Kompartimentierung im Tabak existieren. Durch verschiedene Ansätze soll die Funktion verschiedener Isoformen und die Identifizierung möglicher Interaktionspartner erarbeitet werden. Um dieses Ziel zu erreichen, soll zunächst die Verteilung der Assimilate bei transgenen Tabakpflanzen, Antisense und Überexpression, durch Fütterungsexperimente mit Zuckern untersucht werden. In einem weiteren Ansatz sollen die Interaktionspartner des Hexokinase-Multiproteinkomplexes identifiziert werden. Durch Aufreinigung des Proteinkomplexes mittels TapTag und anschließende enzymatische Bestimmung möglicher Interaktionspartner wie z.B. Phosphoglucomutase werden diese getestet. Zur Aufklärung der Signalwege des Sugar Sensing soll eine Isoform (HxK6) aus Tabakpflanzen, für die wir keine katalytische Aktivität nachweisen konnten, Aufschlüsse liefern. Bei den geplanten Untersuchungen soll die HxK6 aus Tabak in Arabidopsis-Mutanten mit fehlender Hexokinase-Aktivität wie z.B. gin2-1 (glucose insensitive) überexprimiert und auf eine Sensorfunktion mittels Genexpressionsanalysen untersucht werden.
己糖激酶是Kohlenhydratstoffwechsel中的一种中心酶,是一种多蛋白复合物。我们已经知道,己糖激酶同工酶在Tabak中的作用是非常重要的。验证的Ansätze soll die Funktion versionedener Isoformen und die Identifizierung möglicher Interaktionspartner erarbeitet韦尔登.通过与Zuckern韦尔登进行的Fütterungsexperimente试验,我们发现,在转基因烟草、反义和超表达的情况下,这些结果是正确的。在另一项研究中,可鉴定己糖激酶-多蛋白复合物的相互作用伙伴韦尔登。利用TapTag和Anschließenenzymatische Bestimmung möglicher Interaktionspartner wie z.B.磷酸葡萄糖变位酶可以检测到。Zur Aufklärung der Signalwege des Sugar Sensing soll eine Isoform(HxK6)aus Tabakpflanzen,für die wir keine katalytische Aktivität nachweisen konten,Aufschlüsse liefern.在用较弱的己糖激酶激活的突变体中,通过Tabak的HxK 6进行研究。gin 2 -1(葡萄糖不敏感)增强并增强了Genexpressionanalysen的传感器功能,韦尔登。

项目成果

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