Biochemische und molekularbiologische Untersuchungen zum CO2 Konzentrationsmechanismus in Cyanobakterien

蓝藻CO2浓度机制的生化和分子生物学研究

• 批准号: 5211214
• 负责人: Dr. Gabriele Amoroso
• 金额: --
• 依托单位: Fachbereich Biologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 1998-12-31 至 2001-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5211214?language=en
• 关键词: Biochemische; und; molekularbiologische; Untersuchungen; zum

Im Rahmen des beantragten Forschungsstipendiums sollen zunächst neue CCM Mutanten von Synechocystis PCC6803 mit Hilfe von Insertionsmutagenese isoliert werden. Nach deren physiologischer Charakterisierung soll die Sequenz der inaktivierten Genbereiche interessanter Mutanten mittels Plasmid-Recovery aufgeklärt werden, um zum einen Antikörper und zum anderen definierte Mutanten herstellen zu können. Ein weiteres Ziel ist es, die Protein-Kinase(n) zu identifizieren, die an der schnellen Induktion des CCM beteiligt ist (sind). Dazu sollen nacheinander die 8 Protein-Kinasen in Synechocystis, von denen dank des vollständig sequenzierten Genoms die zugrundeliegenden Basensequenzen bekannt sind, inaktiviert werden, um definierte Mutanten konstruieren zu können. Außerdem sollen die während der schnellen Induktion auftretenden phosphorylierten Polypeptide identifiziert werden. Zu diesem Zweck sollen die Proteine mit 33P markiert, elektrophoretisch aufgetrennt und anschließend ansequenziert werden. Nach Identifizierung der entsprechenden Gene können diese amplifiziert werden, um z.B. Antikörper und wiederum spezifische Mutanten herstellen zu können. Alle diese Untersuchungen sollen zu einem besseren Verständnis der dem CCM zugrundeliegenden Mechanismen beitragen.

在研究集胞藻6803的新CCM突变体时，发现了一种新的突变体，该突变体具有插入突变体的韦尔登支持。在生理学特性确定基因突变体失活的测序后，质粒恢复韦尔登效率，从而获得一个Antikörper和一个确定的突变体。另一个问题是，要鉴定的蛋白激酶和CCM的诱导物。因此，我们需要对集胞藻中的8种蛋白激酶进行研究，通过对基因组进行大量测序，发现它们的基本序列是正确的、不活跃的韦尔登，从而确定突变的结构。因此，我们必须解决如何通过诱导来鉴定磷酸化多肽韦尔登的问题。这两种方法都是用33 P标记的蛋白质，电泳增强，并进行韦尔登。在对这种韦尔登进行基因鉴定后，我们发现了Z.B.古代和古代的特殊变种人都在这里。所有这些研究都解决了CCM的一个最好的问题。