Molekularbiologische und biochemische Untersuchungen zur Bildung des Eisenchelators Myxochelin aus Stigmatella aurantiaca (Myxococcales)

橙色臭霉（粘球菌目）铁螯合剂粘螯素形成的分子生物学和生化研究

• 批准号: 5328080
• 负责人: Professor Dr. Rolf Müller
• 金额: --
• 依托单位: Helmholtz-Institut für Pharmazeutische Forschung Saarland
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2000-12-31 至 2008-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5328080?language=en
• 关键词: Molekularbiologische; und; biochemische; Untersuchungen; zur

Die geplanten Arbeiten beschäftigen sich mit der Bio- und Mutasynthese von Myxochelinen, sowie deren Aufnahme- und Exportsystemen. Myxocheline sind die einzigen aus Myxobakterien bekannten Eisenchelatoren, zu denen molekular-biologische Untersuchungen durchgeführt wurden. Das zugehörige Regulon aus S.aurantiaca wurde kürzlich kloniert und analysiert [1]. An der Myxochelin-biosynthese ist eine nicht-ribosomale Peptidsynthetase (NRPS) beteiligt, die eine bislang biochemisch nicht charakterisierte terminale Reduktionsdomäne trägt. Dieser Domänentyp katalysiert vermutlich sowohl bei der Biosynthese von Polyketiden durch Polyketidsynthasen (PKS), als auch bei NRPS reduktive Kettenfreisetzungen, was beispielhaft durch heterologe Expression des Biosyntheseapparates der Myxocheline und anschließende Enzymtests aufgeklärt werden soll. Weitere Biosynthesegene sollen sowohl in vivo durch zielgerichtete Mutation als auch in vitro durch Enzymassays charakterisiert werden. Zusätzlich sollen Adenylierungsdomänen aus dem Myxochelinbiosyntheseapparat kristallisiert werden, um eine Erweiterung und Verfeinerung des nicht-ribosomalen Spezifitätscodes [2,3] zu ermöglichen.

该工厂的工人必须与粘液性细菌的生物和突变体合成物一起工作，这样才能获得营养和出口系统。粘螯素是由粘细菌产生的一种螯合物，可用于分子生物学研究。对橙黄葡萄的调节子进行了克隆和分析[1]。粘螯素的生物合成是一种非核糖体肽合成酶（NRPS），这种生物化学不具有终末还原的特征。通过多聚酮化酶（PKS）生物合成的催化剂类型，以及NRPS还原性酶的催化剂类型，是通过异源表达的粘胆碱生物合成装置和辅助酶的韦尔登测试获得的。通过Zielgerichtete突变在体内产生的生物合成基因也可以通过韦尔登特性在体外产生。因此，我们可以通过粘蛋白生物合成装置韦尔登，对非核糖体特异性标记[2，3]进行识别和验证。