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質量分析での特異ピーク検出によるカルバペネマーゼ産生菌の網羅的検出と蔓延防止対策

利用质谱法进行特定峰检测，全面检测碳青霉烯酶产生菌并采取传播预防措施

基本信息

批准号：
20K18904
负责人：
上田修
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Saga University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Early-Career Scientists
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

収集したカルバペネマーゼ産生腸内細菌目細菌（CPE）95株とカルバペネマーゼ非産生腸内細菌目細菌149株のClinPro Toolsソフトウェアによる相違箇所の検出にセルスメア法およびエタノールギ酸抽出法による再現性が得られないことを確認したため、前処理法の検証を実施した。菌株に与えるストレス環境が酵素活性を促進する可能性があること、βラクタマーゼ酵素に関連する物質の存在、比較的質量の大きいタンパクの分解により得られる特異ピークの可能性を考慮し、次の３つの方法を考案した。１）イミペネムディスクを使用した阻止帯辺縁の継代株の利用、２）１０K Da限外ろ過法による処理、３）タンパク分解酵素による特異ピークの検索。これらの方法について、様々な遺伝子タイプの菌株（IPM型、KPC型、NDM型、OXA型、VIM型）によるPre-testを実施した。さらに各種測定ピークデータを分析し、ピーク検出箇所のみでなくイオン強度の相違も含めて相違箇所を検索した。しかし、いずれの手法および遺伝子タイプにおいても、バイオマーカーとなる特定ピークを検知することができなかった。KPC型のように特定の遺伝子タイプの検知は可能であるが、コロニーの処理のみで網羅的にCPEを検出することが困難であることを確認した。2023年度はAccessソフトウェアによるCPE検出ロジックの再考とともに、βラクタム系薬の酵素による開裂の過程を検知する手法の確立を目指したい。

95 strains of enterobacteria-producing bacteria (CPE) were identified by ClinPro Tools. The possibility of promoting enzyme activity between strains and environment is considered, and the possibility of specific enzyme activity is considered. 1) The use of enzyme inhibitors to prevent the use of mutant strains, 2) 10K Da extra-limiting treatment, 3) The detection of enzyme inhibitors This method includes Pre-test for the strains of IPM, KPC, NDM, OXA and VIM. All kinds of measurement data analysis, data detection, data intensity detection, data detection, data detection The law of the land is the law of the land, and the law of the land is the law of the land. We confirm that it is possible to detect specific genetic components in KPC-type devices, and it is difficult to detect CPEs due to the complexity of the processing of computers. In 2023, the establishment of methods for detecting the cracking process of CPE in Access software was pointed out.