Research on role of intestinal flora and mucosal immune response in enterohemorrhagic Escherichia coli infection

肠道菌群和黏膜免疫应答在肠出血性大肠杆菌感染中的作用研究

• 批准号: 20K22792
• 负责人: 所 俊志
• 金额: $ 1.83万
• 依托单位: Gihu University of Medical Science
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• 财政年份: 2020
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2020-09-11 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K22792/
• 关键词: 腸管内感染制御; 腸管出血性大腸菌; 腸内細菌叢; 多様性; IgA抗体; 菌叢組成; 頑健性; 腸管出血性大腸菌O157:H7; 腸管感染; 感染制御; 腸管出血性大腸菌感染症; 粘膜免疫; 分泌型IgA抗体

腸管出血性大腸菌（Enterohemorrhagic Escherichia coli, EHEC）O157の腸管内感染マウスモデルを用い、腸管内感染制御における腸内細菌叢及び自然IgA抗体の役割について解析を進めている。EHEC O157感染に抵抗性のC3H/HeN及び感受性のICRの2系統のマウスを用いた。マウスに、アンピシリン、バンコマイシン、ネオマイシン及びメトロニダゾールの単剤又は4剤混合を、1日2回、2週間経胃投与した。投与終了5日後にEHEC O157を経胃接種した。接種後1、3、8及び14日の糞便中のEHEC O157の定量を、定量PCR及び培養法により行い、それぞれ糞便1gあたりのコピー数及びcolony forming unitとして算出した。アンピシリン単剤及び4剤混合投与ICRは、接種後1日の糞便中コピー数が、その他の抗菌剤単剤投与ICR及びいずれのC3H/HeNに比較して高かった。4剤混合投与ICRは、アンピシリン単剤投与ICRよりコピー数が高く、培養法でEHECが定量された。一方、アンピシリン単剤投与ICRは培養法ではEHECの定量はされなかった。アンピシリン単剤及び4剤混合投与ICRは、接種後3及び8日においても高いコピー数を維持し、両マウスともに培養法でEHECが定量された。4剤混合投与C3H/HeNは、8日にコピー数は検出限度以下となった。これらの結果は、腸内細菌叢の組成・多様性について、系統差及び抗菌剤投与による改変を組み合わせることで、EHECの腸管内感染に対する抵抗性の異なる腸内環境を作り出すことができること示している。これらをもとに、EHECの腸管内定着から排除までの経過で、それぞれの腸内細菌叢の組成・多様性及び腸内IgA抗体量を比較することにより、腸管内感染制御における腸内細菌叢及び自然IgA抗体の役割を解析できると考えられる。

Enterohaemorrhagic Escherichia coli (EHEC) O157 infection in intestinal tract, intestinal infection control, intestinal bacterial flora and natural IgA antibody service analysis. EHEC O157 infection is resistant to C3H/HeN and susceptible to ICR 2 systems The single agents of, Anon, Balkon,, and are also mixed in 4 doses and administered orally twice a day for 2 weeks. EHEC O157 was inoculated 5 days after administration. Quantification of EHEC O157 in feces on days 1, 3, 8 and 14 after inoculation, quantitative PCR and culture methods were used to calculate the number of cells and colony forming units in feces. Compared with ICR and ICR, the number of C3H/HeN in feces 1 day after inoculation was significantly higher. 4. Mixed dosing with ICR, concentration with ICR, concentration with EHEC A method for quantitative analysis of EHEC by ICR and single cell culture EHEC was quantified on days 3 and 8 after inoculation. 4. Mixed cast and C3H/HeN, 8 days, number of hits below limit The results are as follows: composition, diversity, systemic differences, and changes in the composition and composition of intestinal bacterial flora; differences in resistance to EHEC infection; and differences in intestinal environment. Comparison of intestinal bacterial flora composition, diversity and IgA antibody levels in EHEC, intestinal infection control, intestinal bacterial flora and natural IgA antibody activity.