Development of treatment and animal model for SFTS based on genome-wide screening.

基于全基因组筛选开发 SFTS 治疗和动物模型。

• 批准号: 21H02361
• 负责人: 岡林 環樹
• 金额: $ 11.07万
• 依托单位: University of Miyazaki
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-04-01 至 2026-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-21H02361/
• 关键词: 重症熱性血小板減少症候群; ゲノムワイドスクリーニング; マウスモデル; in vivoイメージング; 宿主因子; 受容体

重症熱性血小板減少症候群（SFTS）の致死率は15-20%にも及ぶが、現在までに特異的治療法は確立されていない。その理由として適切な小動物モデルがないことが挙げられる。そこで本研究では、ゲノムワイドスクリーニング法により、SFTSV増殖を制御する宿主因子を同定し、特異的治療法の開発につなげていく。また組換ウイルスを用いた超高感度in vivoイメージング解析により、正常な免疫能を持つ小動物モデルでの病態解明、治療効果を検証する。課題1： ゲノムワイドスクリーニングによる新規SFTSV増殖制御宿主因子の同定:CRISPR/Cas9ノックアウトライブラリーを用いてSFTSウイルス感染時の細胞変性効果（CPE）を指標にしたスクリーニングと、２）CRISPR-activationライブラリーを用いて蛍光タンパク質を発現できるSFTSシュードウイルスの易感染性を指標にしたスクリーニング、によってSFTSウイルス増殖に必須な宿主因子の網羅的同定を開始し、ウイルスの新規レセプター候補遺伝子Xを同定した。X因子の過剰発現によるSFTSVの感染増強を確認した。抗Gn抗体では感染が抑制されず、Gcタンパク質の膜融合を抑制するペプチド添加により感染が抑制することから、Gc依存的に侵入する際に関連する機能因子であることを確認した。課題2：新規小動物モデルとレポーター発現ウイルスを用いた病原性発現機構の解析：M分節ゲノムプラスミド、L分節ゲノムプラスミドに加えて、レポーター遺伝子（BDFP1.8、NanoLuc、もしくはsecNanoLuc）をNS遺伝子の上流に2A配列で連結して配置した組換えS分節ゲノムプラスミドをそれぞれ構築し、大臣確認を得た。各ゲノムプラスミドを細胞に共導入して組換えウイルスの増殖性を蛍光により確認した。しかしながら、その増殖性が確認できなかった。

Severe febrile thrombocytopenia syndrome (SFTS) has a mortality rate of 15-20%, and specific treatments are now well established. The reason for this is that small animals are not allowed to eat. This study is aimed at identifying host factors that regulate SFTSV proliferation and developing specific therapies. In vivo analysis, normal immunity, maintenance of small animals, detection of pathological and therapeutic effects. Topic 1: The identification of host factors in SFTSV propagation is based on the following new rules:CRISPR/Cas9 activation, SFTS activation, CPE index, CRISPR/Cas9 activation, SFTS activation, CPE index, 2 CRISPR activation, SFTS activation, CPE index, SFTS activation, CPE index, SFTS activation, SFTS activation, CPE index, CPE index, SFTS activation, SF The increase in SFTSV infection due to the presence of factor X was confirmed. Anti-Gn antibodies inhibit infection, Gc protein and membrane fusion, and are associated with functional factors that inhibit infection and Gc dependent invasion. Topic 2: Analysis of pathogenicity development mechanism in the new regulation of small animals: M subsection, L subsection, N subsection. Each of the three groups of cells was introduced into the cell and its reproductive properties were confirmed. It's not easy to recognize the reproductive nature of a child.

项目成果

A high-throughput Neutralizing Antibody Assay for the diagnosis of Severe Fever with Thrombocytopenia Syndrome Virus

高通量中和抗体检测用于诊断严重发热伴血小板减少综合征病毒

• 发表时间: 2022
• 作者: Eugene Mazimpaka;Hideki Tani;Akatsuki Saito;Hirohisa Mekata;Ken Maeda;Keita Ishijima;Yumi Kirino;Tamaki Okabayashi
• 通讯作者: Tamaki Okabayashi

動物病院内で起こった犬から猫2頭へのSFTSV感染事例

兽医医院一只狗传染两只猫SFTSV一例

• 发表时间: 2022
• 作者: 目堅博久;梅木一美 ;山田健太郎;梅北邦彦;岡林環樹
• 通讯作者: 岡林環樹

次なるパンテミックのための人獣共通感染症の理解

了解下一次大流行的人畜共患疾病

• 发表时间: 2022
• 作者: 鈴木玲海;青島圭佑;山崎淳平;小林篤史;木村享史;岡林環樹
• 通讯作者: 岡林環樹

Sever Fever with Thrombocytopenia Syndrome, ~Emerging hemorrhagic fever in Asia~

伴有血小板减少综合症的严重发烧，〜亚洲新出现的出血热〜

• 发表时间: 2022
• 作者: Husna Al Asmaul;Rahman Md Mahfuzur;Lai Yu‐Chang;Chen Hui‐Wen;Hasan Md Nazmul;Nakagawa Takayuki;Miura Naoki;Tamaki Okabayashi
• 通讯作者: Tamaki Okabayashi

SFTS流行地 ”宮崎” からの報告

SFTS热门地区“宫崎”的报道

• 发表时间: 2021
• 作者: Akihisa Oda;Shoko Furukawa;Masahiro Kitabatake;Noriko Ouji-Sageshima;Shota Sonobe;Kaoru Horiuchi;Yuto Nakajima;Kenichi Ogiwara;Ryo Goitsuka;Midori Shima;Toshihiro Ito;Keiji Nogami;岡林 環樹
• 通讯作者: 岡林 環樹