Research on the functional assignment of the IKZF transcription factor by structural difference and on the modulation of transcriptional regulation by mutations in the IKZF1 molecule

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Ikf3 N159Sマウス(ヒトIKZF3 N160S異常に対応)において、胸腺、リンパ節、脾臓、パイエル板などの表現型解析、mRNA発現解析等を行った。その結果ホーミング受容体の発現減弱や、パイエル板におけるリンパ球減少等が認められ、骨髄移植実験では、変異を有する造血幹細胞では、末梢のリンパ組織の再構成が貧弱であることが判明した。さらにdouble KIマウスなども作成し、それぞれの変異の意義づけを明らかにしつつある（論文準備中）。重症IKZF1異常症（DN変異）であるIKZF1 N159Sのマウスモデル(Ikzf1 N159S)も作成し、解析を加えたところ、本変異では造血幹細胞レベルでの障害が認められ、更にNK細胞、骨髄球系細胞、リンパ球の減少や、ホーミング受容体の発現異常やB細胞における機能分子の発現減弱が認められた。これらからIkzf1 N159S, Ikzf3 N159Sには共通する分子機構がある可能性が示唆された。さらに目標としているIKZF1ホモダイマー、IKZF3ホモダイマー、IKZF1/IKZF3ヘテロダイマーの機能分担についても、split GFP及びsplit AirIDタグをつけたIKZF1, IKZF3をIKZF1/2 double KO NALM6細胞に導入して、IKZF1, IKZF3のそれぞれのホモダイマー、ヘテロダイマーを可視化する実験に着手している。現在は、バックグラウンドを減弱させるなど、システムの最適化について取り組んでいるところである。それぞれの転写調節機能、会合領域について、ChIPseq、RNAseq等を用いて解析する体制が整った。