Bリンパ球の終末分化機構と、その原発性免疫不全症における異常について

原发性免疫缺陷病中B淋巴细胞终末分化机制及其异常

• 批准号: 06670483
• 负责人: 若月 芳雄
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 1995
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06670483/
• 关键词: Bリンパ球; 終末分化; BSAP; 原発性免疫不全症; 遺伝子制御; 分化と増殖

Pax-5(BSAP)遺伝子はpro B cellからmature Bまで発現し、終末分化を遂げた形質細胞では、その発現が停止する。我々はこれまで、BSAPがB細胞の細胞増殖を制御し、抗体遺伝子の3'エンハンサーに結合しその活性を抑制することを世界に先駆けて報告してきた。本年度は、これまでのin vitroの結果をin vivoで確認するための幾つかの基礎実験と発生工学的研究に結びつける為の準備を行った。(1)抗体遺伝子軽鎖のkappa promotorと重鎖のエンハンサー、マウスBSAPのcDNAを、用いて発現コンストラクトを作成した。(2)上記発現コンストラクトを形質細胞にトランスフェクトすることにより、形質細胞特異的遺伝子である、B-limp1遺伝子の発現が抑制されることを見いだした。(3)様々なoncogeneの発現が認められているような、形質細胞株あるいは、B細胞株でBSAPを強発現することにより、増殖反応の増加があることを確認した。(4)実際の抗体遺伝子の3'エンハンサー近傍には、様々な、プラスあるいはマイナスのシスエレメントが存在し、かつトランスのファクターの結合部位が存在する可能性があるため、BSAPの抗体産生の制御における役割は、vitroのリポーターを用いた系より、複雑である。これまで二種類の形質細胞株と、BSAPのDNA結合に充分な部位を発現させた実験系では、統計的に有意な抗体産生の抑制は認めなかった。(5)BSAPの発現を蛋白レベルで同定するため、ゲルシフトに加えウエスタンの系を確立した。(6)BSAPの発現停止が終末分化で起こることの意義をさぐるためBSAPのトランスジェニックマウスを制作中である。

Pax-5(BSAP) gene develops from pro B cell to mature B cell, terminal differentiation to cytoplasmic cell, and development stops. We report that BSAP inhibits the proliferation of B cells and inhibits the activity of antibody genes. This year, we have been preparing for the research of basic biological engineering by confirming the results in vitro and in vivo. (1)The antibody gene kappa promoter and the cDNA of BSAP are used to generate the gene. (2)In this paper, the expression of B-limp1 gene was inhibited by the expression of B-limp1 gene. (3)The development of oncogene was confirmed by cell lines and B cell lines. (4)In fact, the antibody gene 3'end of the protein near the reverse, reverse. These two types of cytoplasmic cell lines and BSAP DNA binding sites are fully identified, and statistical studies are conducted to determine the inhibition of antibody production. (5) The development of BSAP protein is consistent with the establishment of the system. (6) The development of BSAP stops at the end of differentiation, and the significance of BSAP development stops at the end of differentiation.

项目成果

Yoshio Wakatsuki et al: "The B Cell-specific Transcription Factor BSAP Regulates B Cell Proliferation" The Journal of Experimental Medicine. 179. 1099-1108 (1994)

Yoshio Wakatsuki 等人：“B 细胞特异性转录因子 BSAP 调节 B 细胞增殖”《实验医学杂志》。