Role of Spred2 in the pathogenesis of cancer and its application for cancer thepapy

Spred2在癌症发病机制中的作用及其在癌症治疗中的应用

基本信息

批准号：
21H02988
负责人：
松川昭博
金额：
$ 11.15万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

○ヒトHCC細胞株は、様々なレベルのSPRED2を発現し、SPRED2ノックダウンにより、ERK1/2活性化が増加した。SPRED2ノックアウト（KO）-HepG2細胞は、上皮間葉系移行（EMT）の特徴を持ち、細胞形態は紡錘形に変化した。SPRED2-KO細胞は、球形やコロニーを形成する能力が高く、幹細胞マーカーを高レベルで発現し、シスプラチンに対してより高い耐性を示した。興味深いことに、SPRED2-KO細胞は、幹細胞表面マーカーであるCD44とCD90をより多く発現しており、WT細胞のCD44+CD90+とCD44-CD90-の集団を分析したところ、CD44+CD90+細胞ではSPRED2のレベルが低く、幹細胞マーカーがより高いレベルで検出された。さらに、WT細胞を3D培養すると内因性のSPRED2発現が減少し、2D培養では回復した。さらに、臨床HCC組織におけるSPRED2のレベルは、隣接する非HCC組織におけるレベルよりも有意に低く、生存率と負の相関があった。したがって、HCCにおけるSPRED2のダウンレギュレーションは、ERK1/2経路の活性化を通じてEMTと幹細胞化を促進し、より悪性な表現型につながると結論した。○肺腺癌での検討を行い、非浸潤癌にくらべて浸潤癌でSpred2の発現が低く、ERK活性化が高い傾向にあることを見いだしている。興味深いことに、EGFR変異の有無による差はない（投稿準備中）。○がん細胞のオートファジーはSpred2によって制御されることを見いだしている。○昨年作成した単鎖Spred2では有効なERK抑制活性がみられなかったため、改めてコンピュータによるシミュレーション解析を行い、新規に５候補を作成した。うち、２つに抗がん剤活性があることを見いだしている。

○人类HCC细胞系表示各种水平的SPRED2，SPRED2敲低增加了ERK1/2激活。 SPRED2基因敲除（KO）-HEPG2细胞具有上皮 - 间质转变（EMT）特征，并且细胞形态更改为纺锤体。 SPRED2-KO细胞具有形成球形和菌落，表达高水平的干细胞标记的高能力，并且对顺铂具有更高的耐药性。有趣的是，SPRED2-KO细胞表达更多的干细胞表面标记CD44和CD90，当分析WT细胞中CD44+ CD90+和CD44-CD90-的种群时，在CD44+ CD90+细胞中，SPRED2的水平较低，并且在较高水平上检测到干细胞标记。此外，WT细胞的3D培养物降低了内源性SPRED2表达，并在2D培养中恢复。此外，临床HCC组织中SPRED2的水平明显低于相邻的非HCC组织中的SPRED2，并且与存活率呈负相关。因此，我们得出的结论是，HCC中SPRED2的下调通过激活ERK1/2途径促进EMT和干细胞化，从而导致更恶性的表型。 ○我们已经研究了肺腺癌，发现与浸润性癌症相比，侵入性癌症的表达往往较低，而ERK激活更高。有趣的是，根据EGFR突变的存在或不存在（准备发布）没有差异。 ○我们发现癌细胞中的自噬受SPRED2的调节。 ○由于去年生产的单链SPRED2没有显示出有效的ERK抑制作用，因此我们再次使用计算机进行了模拟分析，并创建了五个新候选者。已经发现其中两个具有抗癌药物活性。