炎症局所の好中球による単核球浸潤の支配機構の解明

阐明炎症区域中性粒细胞单核细胞浸润的控制机制

基本信息

批准号：
08770161
负责人：
松川昭博
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Kumamoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770161/
关键词：
炎症反応好中球浸潤単核球浸潤 MCP-1 TNFα IL-1 IL-8 サイトカインネットワーク

项目摘要

炎症反応の局面におけるMCP-1の発現動態、その産生細胞を決定し、好中球浸潤と単核球浸潤との相互関係をしるためにこのプロジェクトを計画し,以下の結果を得た.1)Con A刺激ウサギ脾細胞のcDNAライブラリーからMCP-1 cDNAをクローニングし、これを発現ベクターに組み込んだ.2)発現ベクターを動物細胞(COS-7 cell)に組み込み、ウサギMCP-1を発現させ,その培養上清からウサギMCP-1を単離、精製した.3)ウサギMCP-1をウサギ膝関節内に投与し,経時的な炎症反応の推移を観察したが,好中球浸潤を伴わない単核球浸潤は誘導できなかった.4)遺伝子組み替えMCP-1を用いて,ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体を作製し,免疫染色およびELISA測定系を開発した.5)ウサギLPS関節炎におけるMCP-1の産生動態は,LPS投与後2-4時間で最高になり,以後その産生量は急速に減少した.これは,好中球浸潤のピーク(9時間)に先行するものであり,その産生細胞は免疫組織化学的に滑膜表層細胞と判明した.6)抗MCP-1抗体の投与による細胞浸潤の変化を観察すると,LPSによる好中球浸潤に影響はなかったものの,単核球浸潤は有意に抑制された.以上の結果から,MCP-1は炎症の極めて早い時期から産生され,単核球浸潤を誘導していることが明らかとなった.しかし我々の結果から,先行して誘導される好中球から産生される単核球遊走因子が,つづいておこる単核球浸潤を誘導するという従来の仮説は否定的であると思われた.今後は,in vivoにおける他の炎症性サイトカインとのカスケード反応について検討する予定である.

该项目计划在炎症反应中确定MCP-1的表达动力学，其产生的细胞，并将中性粒细胞浸润与单核细胞浸润相关，并获得结果。1）MCP-1 cDNA从Con A A-S-S-S-STERMENT SPERTIAM spection vection的cDNA库中融合了表达vectory。（COS-7）细胞）被纳入兔MCP-1，表达的兔MCP-1，并从其培养的上清液中分离出兔子MCP-1并纯化兔子MCP-1。3）兔MCP-1被施用到兔膝关节中，炎症反应的变化在时间上观察到，但随着时间的流逝，肾脏渗透性且不构成中性胚胎。使用转基因MCP-1制备，并开发了免疫染色和ELISA测量系统。5）5）兔LPS关节炎中MCP-1的生产动力学在LPS施用后2-4小时最高，此后迅速降低了生产量。这是因为中性粒细胞浸润。细胞的峰值（9小时）被免疫组织化学鉴定为滑膜膜的表面细胞。6）观察到由抗MCP-1抗体的给药引起的细胞浸润变化的变化，尽管对LPS中性粒细胞的浸润没有影响，从上面的炎症中炎症却没有抑制。渗透。但是，我们的结果表明，从先前诱导的中性粒细胞产生的单核迁移因子引起了随后的单核浸润。我们将研究体内与其他炎性细胞因子的级联反应。