炎症局所の好中球による単核球浸潤の支配機構の解明

阐明炎症区域中性粒细胞单核细胞浸润的控制机制

• 批准号: 08770161
• 负责人: 松川 昭博
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08770161/
• 关键词: 炎症反応; 好中球浸潤; 単核球浸潤; MCP-1; TNFα; IL-1; IL-8; サイトカインネットワーク

炎症反応の局面におけるMCP-1の発現動態、その産生細胞を決定し、好中球浸潤と単核球浸潤との相互関係をしるためにこのプロジェクトを計画し,以下の結果を得た.1)Con A刺激ウサギ脾細胞のcDNAライブラリーからMCP-1 cDNAをクローニングし、これを発現ベクターに組み込んだ.2)発現ベクターを動物細胞(COS-7 cell)に組み込み、ウサギMCP-1を発現させ,その培養上清からウサギMCP-1を単離、精製した.3)ウサギMCP-1をウサギ膝関節内に投与し,経時的な炎症反応の推移を観察したが,好中球浸潤を伴わない単核球浸潤は誘導できなかった.4)遺伝子組み替えMCP-1を用いて,ポリクローナル抗体およびモノクローナル抗体を作製し,免疫染色およびELISA測定系を開発した.5)ウサギLPS関節炎におけるMCP-1の産生動態は,LPS投与後2-4時間で最高になり,以後その産生量は急速に減少した.これは,好中球浸潤のピーク(9時間)に先行するものであり,その産生細胞は免疫組織化学的に滑膜表層細胞と判明した.6)抗MCP-1抗体の投与による細胞浸潤の変化を観察すると,LPSによる好中球浸潤に影響はなかったものの,単核球浸潤は有意に抑制された.以上の結果から,MCP-1は炎症の極めて早い時期から産生され,単核球浸潤を誘導していることが明らかとなった.しかし我々の結果から,先行して誘導される好中球から産生される単核球遊走因子が,つづいておこる単核球浸潤を誘導するという従来の仮説は否定的であると思われた.今後は,in vivoにおける他の炎症性サイトカインとのカスケード反応について検討する予定である.

The dynamics of MCP-1 expression and production in inflammatory response are determined by the interaction between neutrophil infiltration and neutrophil infiltration, and the following results are obtained: 1)Con A stimulates MCP-1 cDNA expression in splenocytes; 2)Con A stimulates MCP-1 cDNA expression in animal cells.(COS-7 cell) The expression of MCP-1 in the cell culture supernatant was isolated and refined. 3) MCP-1 was isolated and purified in the knee joint, and the progression of inflammatory response in the knee joint was observed. 4) MCP-1 in the cell culture supernatant was isolated and refined. 5) MCP-1 production dynamics during LPS arthritis reached a peak 2-4 days after LPS administration, and then decreased rapidly. 6) The administration of anti-MCP-1 antibody and the change of cellular infiltration were observed. LPS induced the change of cellular infiltration and the change of cellular infiltration was intentionally inhibited. As a result,MCP-1 was produced in the early stages of inflammation and induced in the early stages of nuclear infiltration. The result is that the first step is to induce a good ball to produce a single ball wandering factor, and the second step is to induce a single ball infiltration. In the future,in vivo, other inflammatory cells will be examined.

项目成果

M.Kimura: "Blocking of TNF-α and IL-1 inhibits leukocyte infiltration at early,but not at late stage of S.aureus-induced arthritis and concomitant cartilage destruction in rabbits." Clin.Immunol.Immunopath.(in press.). (1997)

M. Kimura：“阻断 TNF-α 和 IL-1 可抑制金黄色葡萄球菌诱导的兔子关节炎的早期白细胞浸润和伴随的软骨破坏（出版中）。 ）（1997）。

A.Matsukawa: "Detection and characterization of IL-1 receptor antagonist in tissues from healthy rabbits : IL-1 receptor antagonist is probably involved in health." Cytokine. (in press). (1997)

A.Matsukawa：“健康兔子组织中 IL-1 受体拮抗剂的检测和表征：IL-1 受体拮抗剂可能与健康有关。”

松川昭博: "The Journal of the Japanese Orthopaedic Association" 日本整形外科学会, 8 (1996)

松川昭宏：《日本骨科协会杂志》日本骨科协会，8（1996）

Apostolopoulos.J.: "Interleukin-1 recepteor antagonist : characterization of its gene expression in rabbit tissues and large-scale expression in eucaryotic cells using a baculovirus expression system." J.Immunol.Methods. 199. 27-35 (1996)

Apostolopoulos.J.：“Interleukin-1 受体拮抗剂：利用杆状病毒表达系统表征其在兔组织中的基因表达以及在真核细胞中的大规模表达。”

T.Fukumoto: "Administration of neutralizing antibody against rabbit IL-1 receptor antagonist exacerbates lipopolysaccharide-induced arthritis in rabbits." Inflamm.Res.45. 479-485 (1996)

T.Fukumoto：“给予兔 IL-1 受体拮抗剂的中和抗体会加剧兔体内脂多糖诱导的关节炎。”