炎症局所での好中球浸潤支配機構とサイトカインカスケードの解明

阐明控制中性粒细胞浸润的机制和炎症部位的细胞因子级联

• 批准号: 09770154
• 负责人: 松川 昭博
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09770154/
• 关键词: 炎症; サイトカイン; ケモカイン; サイトカインカスケード

ウサギ急性炎症モデルでのGROの発現動態およびその役割を調べるためには,その遺伝子組み換え体および抗体の作製が必要となる.そこで,LPS刺激ウサギ脾細胞のcDNAライブラリーからGRO cDNAをクローニングし,これを発現ベクター(pQE-30:QIAGEN社)に組み込み,試大腸菌(E.coli M15[pREP4])に導入,ウサギGROの発現を拭みた.次に,大腸菌抽出液からGROタンパクを単離精製し,これをマウスおよびヤギにアジュバントとともに免疫し,モノクローナル抗体およびポリクローナル抗体を作製した.得られた抗体はウサギGROは認識するものの,他のウサギサイトカイン(TNFα,IL-1β,lL-8,MCP-1,IL-1 receptor antagonist)は認識せず,したがって炎症局所のGROの産生動態を知るうえで有用なツールと考えられた.そこで,ウサギGROをウサギ膝関節内に投与し,その時誘導される炎症反応を観察しようと計画した.しかしながら,上記GROは不溶性(8M Ureaには可溶)であったため,これをin Vivoに投与できなかった.そのためBaculovirus Transfer Vectorを用いる方法(Invitrogen社)で再度遺伝子組み換え体の作製を行い,その培養上清および細胞中から可溶性のGROを得た.現在このタンパクを精製中であり,精製後はin Vivoに投与し,その時の炎症反応を観察するとともに,ウサギ炎症モデルでのGROの産生動態を解明しその炎症反応への関与を明らかにしていく予定である.

It is necessary to regulate the development of GRO in acute inflammation and the production of antibodies. In addition,LPS stimulated the cDNA sequence of spleen cells and GRO cDNA sequence, and the gene expression of GRO in spleen cells (pQE-30:QIAGEN Corporation) was detected. Escherichia coli (E.coli M15[pREP4]) was introduced. In addition, Escherichia coli extract was purified, and the preparation of Escherichia coli antibody was carried out. Antibodies against GRO were found to be useful in detecting the dynamics of GRO production in inflammatory cells. The knee joint is a joint of the knee and the knee.しかしながら,上记GROは不溶性(8M Ureaには可溶)であったため,これをin Vivoに投与できなかった. Baculovirus Transfer Vector (Invitrogen) was used to produce soluble GRO in culture supernatant and cells. Now this tapanpaku is being refined, and after refining it will be put into Vivo to observe the inflammatory reaction at any time. In addition, the dynamics of GRO production in the inflammatory environment can be understood and the relationship between the inflammatory reaction and the inflammatory reaction can be clearly determined.

项目成果

Akihiro Matsukawa: "Analysis of the inflammatory cytokine network among TNFα, IL-β, IL-1 receptor antagonist and IL-8 in LPS-induced rabbit arthritis." Labo Invest.76. 629-638 (1997)

Akihiro Matsukawa：“LPS 诱导的兔关节炎中 TNFα、IL-β、IL-1 受体拮抗剂和 IL-8 之间的炎症细胞因子网络分析。”76 (1997)。

松川昭博: "尿酸塩による関節炎の病態" Mebio. 14. 56-62 (1997)

Akihiro Matsukawa：“尿酸盐诱发的关节炎的病理学”Mebio 14. 56-62 (1997)。

Sumitaka Imamura: "Involvment of tumor necrosis factor-α, interleukin-1β, interleukin-8, and interleukin-1 receptor antagonist in acute lung injury caused by Schwarzman reaction." Pathol.International. 47. 16-24 (1997)

Sumitaka Imamura：“肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β、白细胞介素-8 和白细胞介素-1 受体拮抗剂在 Schwarzman 反应引起的急性肺损伤中的作用。国际” 47. 16-24 (1997)。

Akihiro Matsukawa: "Detection and characterization of IL-1 receptor antagonist in tissues from healthy rabbits : IL-1 receptor antagonist is probably involved in health." Cytokine. 9. 307-315 (1997)

Akihiro Matsukawa：“健康兔子组织中 IL-1 受体拮抗剂的检测和表征：IL-1 受体拮抗剂可能与健康有关。”

Makoto Kimura: "Blocking of TNF-α and IL-1 inhibits leukocyte infiltration at early, but not at late stage of S.aureus-induced arthritis and concomitant cartilage destruction in rabbits." Clin.Immunol.Immunopath.82. 18-25 (1997)

Makoto Kimura：“阻断 TNF-α 和 IL-1 可抑制金黄色葡萄球菌诱导的兔子关节炎和伴随软骨破坏的早期白细胞浸润，但不能抑制其晚期。”18-25。 (1997)