ニホンジカ寄生住肉胞子虫の下痢毒性因子の検出および毒性機序の解明

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住肉胞子虫Sarcocystis属を原因とする馬肉の食中毒については、S. fayeriの腸管毒性候補因子として15 kDaタンパク質（アクチン脱重合因子；ADF）が報告されているが、その発症機序や病態の詳細は不明である。本研究では、S. fayeriの毒性について、毒性因子の探索と病態解明を目的とした研究を行った。ウマの筋組織から回収したS. fayeriのシストから抽出した水溶性タンパク質を陽イオン交換クロマトグラフィーによりNaCl 100-200(mM)、200-300、300-400、400-500の濃度勾配にて電荷依存的に分画し、各分画を日本白色ウサギ腸管結紮ループに投与した。陽性対照にはウェルシュ菌のエンテロトキシン、陰性対照にはリン酸緩衝液(PBS)を用いた。約18時間後にF/A値（腸管ループ内液体量／長さ）を用いてループ内の液体貯留を評価した。さらに各ループのHE染色組織標本にて内管腔組織を観察した。NaCl 100-200(mM)、200-300、300-400、400-500、フロースルー(FT)分画を投与した腸管ループ試験のFA値は0.03、0.01、0.09、0.04、0.34であった(n=3、陰性対照0.02、陽性対照1.31)。また、陰性対照以外の全ての分画投与ループの内管腔組織に偽好酸球浸潤を認めた。陰性対照との比較から、S. fayeri由来の水溶性タンパク質のうち、NaCl 300-400 mM分画とFT分画に含まれるタンパク質が腸管ループに液体貯留を起こすことが示唆された。また、陰性対照以外の全てのタンパク質分画で偽好酸球の浸潤が認められた。偽好酸球浸潤を起こす分画と液体貯留を起こす分画が一致しないことから、下痢発症と偽好酸球浸潤はそれぞれ異なる二つ以上の因子が起こしていることが示唆された。