新生児壊死性腸炎に対する腸管再生を目指した新規治療法の開発

新生児壊死性腸炎（NEC）は早産児の生命予後および神経学的予後を大きく悪化させる合併症の一つである。本研究の目的は、Multilineage-differentiating stress enduring cells（Muse細胞）を用いて新規治療法を開発することである。妊娠21日目のSDラットを帝王切開し新生仔を出生させ、人工栄養3回/日、低酸素および低体温負荷（100%CO2 10分 + 4℃ 5分）2回/日+LPS4mg/kg経腸管投与（生後2時間、48時間）の全96時間で新生児壊死性腸炎（NEC）モデルを作製する。日齢1にMuse細胞、またはMuse細胞以外の間葉系幹細胞(それぞれ1×10^4cells/個体）、または、Vehicle（HBSS）を腹腔内投与し、下記の評価方法で効果を判定した。①生存率 ②生後96時間に腸管を採取、組織切片を作製、病理学的スケールを用いてNECの重症度を判定。③Caspase３抗体で免疫染色し、細胞死および炎症性変化を免疫組織学的に評価。生存率は、3群間で有意差を認めなかった。また、HE染色による病理学的スケールでのNEC重症度も、わずかにMuse投与群で下がる傾向はあったが、有意差はなかった。さらに、Caspase3抗体でのアポトーシス評価に関しても、若干の軽減を認めるものの有意ではなかった。以上より、上記プロトコールでは、Muse細胞投与の有効性を見出せなかった。

新生児壊死性腸炎（NEC）は早産児の生命予後および神経学的予後を大きく悪化させる合併症の一つである。本研究の目的は、Multilineage-differentiating stress enduring cells（Muse細胞）を用いて新規治療法を開発することである。妊娠21日目のSDラットを帝王切開し新生仔を出生させ、人工栄養3回/日、低酸素および低体温負荷（100%CO2 10分 + 4℃ 5分）2回/日+LPS4mg/kg経腸管投与（生後2時間、48時間）の全96時間で新生児壊死性腸炎（NEC）モデルを作製する。日齢1にMuse細胞、またはMuse細胞以外の間葉系幹細胞(それぞれ1×10^4cells/個体）、または、Vehicle（HBSS）を腹腔内投与し、下記の評価方法で効果を判定した。①生存率 ②生後96時間に腸管を採取、組織切片を作製、病理学的スケールを用いてNECの重症度を判定。③Caspase３抗体で免疫染色し、細胞死および炎症性変化を免疫組織学的に評価。生存率は、3群間で有意差を認めなかった。また、HE染色による病理学的スケールでのNEC重症度も、わずかにMuse投与群で下がる傾向はあったが、有意差はなかった。さらに、Caspase3抗体でのアポトーシス評価に関しても、若干の軽減を認めるものの有意ではなかった。以上より、上記プロトコールでは、Muse細胞投与の有効性を見出せなかった。