权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

Analysis of vesicular traffic involving systemic RNAi

涉及系统 RNAi 的囊泡交通分析

基本信息

批准号：
20H03422
负责人：
三谷昌平
金额：
$ 10.32万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、RNA干渉(RNAi)が細胞間で伝播する現象に焦点を当て、それに関わる小胞輸送分子の機能解析を行う。線虫で最初に見つかった全身性RNAi(ある組織でRNAiが起こると別の組織に同様の効果が伝播すること)の分子細胞メカニズムとその生理学的意義の解明を目指している。dsRNAのような生体高分子の開口分泌とエンドサイトーシスに依存する可能性が高い。我々はこの現象に関与する新たな分子を多数発見しているが、その中で亜鉛トランスポーターとRab GAPタンパク質に焦点を当てて、線虫遺伝学を利用して作用メカニズム解析をしている。(テーマ1) 亜鉛トランスポーター変異体がEri表現型(RNAi増強)を呈することから、亜鉛による制御を受ける分子でどのような表現型を持つかを調べた。培地への亜鉛の添加により、RNAi効果は減弱し、他のイオン（カルシウム、マグネシウム、マンガン、鉄）では抑制効果は見られず、亜鉛に特異的であった。(テーマ2) 我々は、順遺伝学スクリーニングで全身性RNAiが減弱する分子を見出した。そのうちの１つは、TBC-3（Rab GAP活性を持つ）であり、別の新規分子(線虫特異的なタンパク質をコード)をREXD-1と名付けた。これらの変異体では、腸管からのdsRNAの放出が低下するが、他の組織でのdsRNAの取り込みは正常である。卵細胞への卵黄の取り込みも正常に行われることから、腸管からの卵黄タンパク質の放出は正常であることが分かった。神経伝達物質の放出が正常である(運動などが正常に起こる)など、機能としては、dsRNAの分泌に特化していることが示された。Rexd-1、tbc-3、sid-5（既報の腸管からの分泌に関与する分子）の三重変異体では、全身性RNAiが全く起こらなくなることから、３種類の経路が冗長的に働いてdsRNAの放出に関与していることが解明された。

In this study, we focused on RNA interference (RNAi) and its role in cell-to-cell transmission. The molecular and cellular mechanisms of systemic RNAi(RNAi initiation in tissues and effects in other tissues) were initially identified and their physiological significance clarified. The possibility that the secretion of biopolymer is dependent on the growth of biopolymer is very high. We are concerned with the phenomenon and the development of new molecules. We are concerned with the development of new molecules. We are concerned with the development of new molecules. (1) Eri phenotype (RNAi enhancement) is expressed in the presence of a regulatory molecule. The addition of lead in culture, RNAi effect is weakened, and other factors (such as calcium, magnesium, iron) are inhibited. (2) Molecular evidence of systemic RNAi attenuation was found in the study. TBC-3 (Rab GAP activity), REXD-1, and other new molecules (thread-specific). The release of dsRNA from the intestine is low, and the acquisition of dsRNA from other tissues is normal. The egg cell yolk is removed from the egg cell and the egg yolk is released from the egg cell. The release of neurotransmitter substances is normal, the function is normal, the secretion of dsRNA is specialized. Rexd-1, tbc-3, sid-5 (both reported intestinal secretion related molecules) triple heterogeneic, systemic RNAi is fully initiated, three types of long pathways are involved in dsRNA release and resolution.