ニューロン細胞種決定に寄与するMec-3蛋白質の下流遺伝子制御機構の解析

有助于神经细胞类型决定的Mec-3蛋白下游基因调控机制分析

基本信息

批准号：
06780661
负责人：
三谷昌平
金额：
$ 0.7万
依托单位：
Tokyo Women's Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1994
资助国家：
日本
起止时间：
1994 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06780661/
关键词：
ニューロン分化決定転写因子 C-elegans

项目摘要

脳などの神経組織でニューロンが多様な分化を行なうメカニズムにおいて、神経系分化制御を担う転写因子のネットワークが重要な役割を果たしていると思われる.神経系の発生と構造の基本的な記載が充実している線虫C.elegansをモデル動物とし、特に、機械刺激受容ニューロンの分化に焦点を当て、lin-32、unc-86やmec-3遺伝子のカスケードおよびこれらとネットワーク的に作用する因子群を同定し、これらの作用様式を明らかにしてきた.しかしながら、このネットワーク中には分化決定機構の説明ができない細胞種が存在することから、未だ同定できていない因子が多数存在すると思われる.そこで、カスケードの中心的な役割を担う転写制御因子UNC-86の標的遺伝子を単離することで、この遺伝子制御機構の未知の部分を明らかにしていくことを目的としている.標的遺伝子単離の方法としては、KinzlerとVogelsteinによるWhole Genome PCR法を用いた.現在までに、約120のクローンの独立したDNA断片が得られている.これらのDNA断片のほとんどはUNC-86の標的として既知のmec-3制御領域とほぼ同等のUNC-86結合活性を有していることが分かった.線虫ゲノムのシークエンスプロジェクトによって登録済みのコスミド配列(全ゲノムの数%)を検索し、7個の該当部位を見い出した.このうち、5クローンは遺伝子の制御領域と成りえる部位に存在し、さらに発現解析を行う予定である.これらの遺伝子は既知の蛋白質と相同性の認められない(またはとても低い)蛋白質をコードしていた.

看来，转录因子网络负责控制神经组织的神经元分化机制（例如大脑）的神经元分化机制，从而起着重要作用。该模型动物基于秀丽隐杆线虫，该模型对神经系统的发展和结构具有全面的基本描述，尤其是我们已经确定了Lin-32，UNC-86和MEC-3基因的级联反应，以及与这些作用进行网络行动的因素组，这些动作如下：公式已澄清。但是，由于该网络中有细胞类型无法解释分化确定的机制，因此可能有许多因素尚未鉴定出来。因此，目的是通过隔离UNC-86的靶基因（一种在级联反应中起着核心作用的转录调节因子）来阐明该基因调节机制的未知部分。分离靶基因的方法是Kinzler和Vogelstein的整体。使用了基因组PCR。迄今为止，已经获得了大约120个独立的DNA片段。这些DNA片段中的大多数具有UNC-86结合活性，大致相当于已知的MEC-3调节区域作为UNC-86的靶标。线虫基因组的测序项目搜索了注册的宇宙序列（所有基因组的数量），并找到了七个位点。其中，五个克隆存在于可以用作基因调节区域的位点，并计划进一步表达分析。这些基因编码与已知蛋白质同源（或非常低）同源的蛋白质。