転写因子UNC-86の下流遺伝子群の単離と機能解析

转录因子UNC-86下游基因的分离及功能分析

• 批准号: 07680856
• 负责人: 三谷 昌平
• 金额: $ 0.7万
• 依托单位: Tokyo Women's Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for General Scientific Research (C)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07680856/
• 关键词: ニューロン; 細胞種; 分化決定; 転写制御因子; C.elegans; ゲノム

脳などの神経組織でニューロンが多様な分化を行なうメカニズムにおいて、神経系分化制御を担う転写因子のネットワークが重要な役割を果たしていると思われる.本研究の目的は、神経系の分化の記載が充実している線虫C.elegansをモデル生物とし、代表的な神経分化制御を行っている転写因子UNC-86蛋白質が転写制御している下流遺伝子群を単離し、神経系の分化と機能発現における役割を明らかにすることである.標的遺伝子候補の単離の方法としては、KinzlerとVogelsteinによるWhole Genome PCR法を用いた.現在までに、塩基配列決定により、115個の独立したクローンDNA断片が同定されている.これまでにこれらの塩基配列を用いてGenBankに登録されたC.elegansゲノムシークエンスの検索を行い、10種のユニークな部位を同定した.推定されるコード領域と比較し、得られたDNA断片が遺伝子発現制御領域である可能性のあるものが7種あった.このうちの2種について5'隣接領域とペプチドコード領域の一部を含むDNA断片をPCRによりクローン化し、lacZ融合遺伝子を作成した後、C.elegansトランスジェニック動物での発現パターンを観察した.1つはサブセットの核に発現していると思われ、ニューロンの前駆細胞の可能性を考えている.もう一方は発現を証明することができなかった.これは、用いた5'隣接領域のDNAが発現のために充分な情報を持っていなかったことが想像される.今後、これらの候補遺伝子に関して、より大きなDNA断片を用いて発現解析を行う予定である.また、標的遺伝子であることが確認されたものについては変異体の分離と表現型の解析によりその遺伝子機能を推定する.

脳 な ど の god 経 organization で ニ ュ ー ロ ン が many others in line な differentiation を な う メ カ ニ ズ ム に お い て royal を bear う, god 経 differentiation system planning write factor の ネ ッ ト ワ ー ク が important な "を cut fruit た し て い る と think わ れ る. Purpose の this study は の の differentiation, god 経 department of が charge be し て い る worm c. elegans を モ デ ル biological と し, representative な god 経 differentiation system of imperial を っ て い る planning write factor UNC - 86 protein が planning write suppression し て い る dirty legacy 伝 subgroup を 単 経 し, god is の と differentiation function 発 now に お け る "を cut Ming ら か に す る こ と で Youdaoplaceholder0. The target 伝 sub-candidate 単 separation method と <s:1> て た, KinzlerとVogelsteinによるWhole Genome PCR method を for を た. Now ま で に, salt base with column decided に よ り, 115 の independent し た ク ロ ー ン DNA fragment が with fixed さ れ て い る. こ れ ま で に こ れ ら の salt base matched with column を い て GenBank に login さ れ た c. elegans ゲ ノ ム シ ー ク エ ン ス の 検 cable line を い, 10 kinds of の ユ ニ ー ク を な parts with fixed し た. Presumption さ れ る コ ー と compare し ド field, and ら れ た DNA fragment が posthumous son 伝 発 suppression area now で あ る possibility の あ る も の が seven あ っ た. こ の う ち の two に つ い て 5 '隣 meet field と ペ プ チ ド コ ー の ド field contains a を む DNA fragment を PCR に よ り ク ロ ー ン し, lacZ fusion heritage 伝 son を made し た after, C. elegans ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク animal で の 発 now パ タ ー ン を 観 examine し た. 1 つ は サ ブ セ ッ ト の nuclear に 発 now し て い る と think わ れ, ニ ュ ー ロ ン の former 駆 cells の possibility を え て い る. も う side は 発 を now prove す る こ と が で き な か っ た. こ れ は, use い た 5 '隣 meet field の DNA が 発 の now Youdaoplaceholder0 sufficient な information を hold って な な った とが とが imagine される. Son in the future, こ れ ら の alternate heritage 伝 に masato し て, よ り big き な DNA fragment を with い て 発 now line analytical を う designated で あ る. ま た, mark but 伝 で あ る こ と が confirm さ れ た も の に つ い て は - variant の separation と phenotype の parsing に よ り そ の heritage 伝 sub function を presumption す る.

项目成果

Mitani, S.: "Genetic regulation of mec-3 gene expression implicated in the specification of the mechanosensory neuron cell types in Caenorhabditis elegans." Dev. Growth & Differ.37. 551-557 (1995)

Mitani, S.：“mec-3 基因表达的遗传调控与秀丽隐杆线虫机械感觉神经元细胞类型的规范有关。”

Mitani, S.: "A genetic pathway for reuronal cell type diversification in Caenorhabditis elegans in “Basic neurascience in Inverterbrates"" Japan Scientific Societies Press, 13 (1996)

Mitani, S.：“《无脊椎动物基础神经科学》中秀丽隐杆线虫肾细胞类型多样化的遗传途径”，日本科学协会出版社，13 (1996)

三谷昌平: "線虫の神経発生" 細胞. 27. 199-202 (1995)

Shohei Mitani：“秀丽隐杆线虫的神经发生”细胞。 27. 199-202 (1995)