Identification of novel causative gene mutations and targets for treatment in pulmonary arterial hypertension

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肺動脈性肺高血圧症(PAH)は生命予後不良の難治性稀少疾患であるが、発症メカニズムの多くは不明であり、病態全容解明・病態進行機序解明に向けての探索が重要である。我々はヒト検体を用いた次世代シークエンサー(NGS)解析を施行し、細胞骨格や細胞接着に関与する有力な新規発症原因候補遺伝子としてRing finger protein 213 (以下RNF213)を見出した。RNF213の多型変異であるR4810K変異を有する患者は、既知のPAH発症原因遺伝子である2型骨形成タンパク受容体(BMPR2)遺伝子変異を有する患者より生命予後不良であり、RNF213 R4810K変異への治療介入の重要性が示唆された。本研究ではRNF213 R4810Kの機能をin vivoで解析し、RNF213に関連したシグナルの異常によってPAHが発症する機構を解明し、分子標的薬のターゲット検索を目的とした。ガイドRNA、ss-ODNのデザインを行い、Rnf213 R4810K変異陽性マウスを作製した。Rnf213 R4810K変異陽性マウスは常酸素下での飼育ではPAHを発症しなかった。Rnf213 R4810Kヘテロ変異マウスは、野生型マウスと比較して、3か月間の10%低酸素環境曝露後の右室収縮期圧、右室左室重量比が有意に高値であり、PAHの所見を認めた。また肺病理のEVG染色では有意な中膜壁肥厚を認めた。Rnf213 R4810Kホモ変異マウスも右室収縮期圧、右室左室重量比は高値の傾向にあり、肺動脈中膜は有意な肥厚を認めた。肺のマイクロアレイ解析ではRnf213 R4810Kヘテロ変異、ホモ変異マウスともに、細胞周期や細胞接着を制御する複数の因子において有意な発現増減を認めており、RT-qPCRでも同様の増減を確認した。今後新規治療ターゲットとして、阻害薬を用いた実験を検討している。