サクラ属自家不和合性における新規の花粉側共通因子候補DNaJ-likeの機能解明

DNAaJ-like的功能阐明,一种新的花粉侧共同因子候选物,导致李属自交不亲和性

基本信息

项目摘要

本研究課題では、サクラ属のS-RNase依存性自家不和合性における共通因子候補として単離したDNaJ様タンパク質SDJ(仮称)の機能解析を目的としている。3年目にあたる令和4年度は以下の調査を行った。A. SDJの花粉内相互作用タンパク質の探索: 抗SDJ抗体を固相化したビーズを用いて花粉タンパク質の共免疫沈降ならびにLC-MS/MSを行ったところ,SDJと結合するタンパク質候補としてSLFL6が形成するSCF複合体およびリボソーム関連タンパク質を同定できた。B.SDJの細胞内局在調査:GFPをC末端に融合した組換えSDJ-GFPタンパク質をアグロインフィルトレーション法によってベンサミアーナタバコ葉で一過的に発現させ、共焦点レーザー顕微鏡で観察したところ、SDJは細胞質に局在するタンパク質であることが示唆された。C. SDJの不和合反応への関与の検証:‘佐藤錦’(S3S6)花粉の液体発芽培地における花粉管伸長は組換えS3-およびS6-RNase混合物の添加によって特異的に抑制された.SDJアンチセンスオリゴを単独で液体発芽培地に添加した際は花粉管伸長に影響はみられなかったが、組換えS-RNase混合物とSDJアンチセンスオリゴを同時に添加したところ、組換えS-RNase混合物による花粉管伸長の抑制は有意に緩和された.このことから、SDJは不和合反応に関与している可能性が示唆された。
This research topic aims to analyze the functional characteristics of SDJ (name), a common factor candidate for S-RNase dependence and incompatibility, and a simple DNaJ sample. 3 years old and 4 years old A. SDJ pollen interaction: anti-SDJ antibody solid-phase, anti-SDJ antibody B. Investigation of SDJ's intracellular structure: GFP C-terminal fusion, SDJ-GFP protein fusion, SDJ C. SDJ's Incompatibility and Reversal: The pollen tube elongation of 'Sato Nishiki'(S3S6) was inhibited by the addition of S3-S6-RNase mixture in liquid bud culture. The pollen tube elongation of 'Sato Nishiki'(S3S6) was inhibited by the addition of S3-S6-RNase mixture in liquid bud culture. The inhibition of pollen tube elongation by S-RNase mixtures was intentionally mitigated. The possibility of a conflict between SDJ and the United States is shown.

项目成果

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专利数量(0)
オウトウ‘ 佐藤錦’ 花粉管の自己雌ずい内における伸長パターンの評価
佐藤锦李子雌蕊花粉管伸长模式的评价
  • DOI:
  • 发表时间:
    2021
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    小山和哉;大浜友子;服部あゆみ;岩下和裕;後藤(山本)奈美;松原陽一;Takashi Onozaki and Takuo Fujimoto;松本大生・山崎稜平・平 智
  • 通讯作者:
    松本大生・山崎稜平・平 智
S-RNaseと結合する花粉発現DNaJ様タンパク質の特性評価
花粉表达的结合 S-RNase 的 DNA 样蛋白的表征
  • DOI:
  • 发表时间:
    2022
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Li Jixiao;Suzuki Yumeno;Hoshino Yoichiro;松本大生・増井果歩・金岡雅浩・田尾龍太郎
  • 通讯作者:
    松本大生・増井果歩・金岡雅浩・田尾龍太郎
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  • 通讯作者:
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