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Functional analysis of translocon factors involved in the topogenesis of membrane proteins

参与膜蛋白拓扑发生的易位子因子的功能分析

基本信息

批准号：
20K06510
负责人：
阪口雅郎
金额：
$ 2.75万
依托单位：
University of Hyogo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2020
资助国家：
日本
起止时间：
2020-04-01 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-20K06510/
关键词：
細胞小器官膜タンパク質生体膜膜透過

项目摘要

生体を構成する最小単位である細胞の中には、粗面小胞体という小器官があって、細胞を形作る生体膜の内在膜タンパク質や細胞の外に分泌されるタンパク質の合成と膜透過を行っている。本研究は、粗面小胞体リボソームで膜タンパク質が作られるときの、タンパク質の形づくりの仕組みの解明を目指している。昨年度の進展に加えこれまでの進捗実績は下記である。（１）膜結合型リボソームから伸長するポリペプチド鎖が膜定着する機構について解析した。合成されるポリペプチド鎖の疎水性の高い配列部分が膜透過トンネルに進入した時点で膜内に定着し配置が決定する機構に加えて、一度膜透過チャネルを通り抜けた後に、ポリペプチド鎖後方にある正荷電アミノ酸残基によって逆方向の動きが誘起され、疎水性の不十分なポリペプチド鎖が膜に定着する機構があることを示した。（２）タンパク質膜透過トンネルの作用効率に関連する遺伝子を探索して、欠損によって疎水性配列の透過、正電荷クラスタの透過、シグナル配列の機能効率などに大きく影響する遺伝子を見出した。小胞体内腔のHsp70-シャペロンKar2pの過剰発現によって、疎水性配列のみならず正電荷クラスタの透過が大きく亢進することを発見した。また、小胞体内腔のシャペロン制御因子であるJ-タンパク質Scj1pの欠損により膜透過が大きく亢進することを見いだした。小胞体における合成共役型ポリペプチド鎖膜透過が、内腔シャペロン系によって駆動されることの発見は、これまでリボソームによる合成伸長が駆動要因とされてきた「共役型」透過でも、内腔Kar2p-Jタンパク質シャペロン系が大きくかかわることを示し、これまでの通説を覆すものである。本年度は特に、特徴的なドミナントネガティブ作用を示す多数の点変異体を見出すことができたので、その膜透過に関する作用を今後詳細に解析する。

The smallest cell structure is the inner membrane of the cell, the outer membrane of the cell, and the outer membrane of the cell. In this study, the structure and structure of rough surface cells were studied. Last year's progress was recorded as follows: (1) Membrane bonding type: the elongation of the membrane is determined by the mechanism of membrane fixation. In addition, after the membrane transmission occurs, the positive charged acid residue is induced to move in the reverse direction, and the water content is not very high. (2) The correlation between the transmission efficiency of plasma membrane and the transmission efficiency of water, the transmission efficiency of positive charge and the transmission efficiency of water, the transmission efficiency, the transmission efficiency of water, the transmission efficiency, the transmission efficiency, Hsp70-Kar2p transition in microcellular space, water alignment, and transmission of positive charges The membrane permeability of the micro-cell cavity is increased. Small cell type composite co-active type composite type composite co-active type composite type composite This year, the characteristics of the film production process, the role of most of the point of view, the role of film transmission, will be analyzed in detail in the future.