课题基金 / 基金详情

ミトコンドリアのタンパク質輸入装置複合体の構造解析

ミトコンドリアのタンパク質輸入装置複合体の構造解析
线粒体蛋白质输入装置复合物的结构分析
批准号：
13033030
负责人：
阪口 雅郎
金额：
$2.3万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2001 至 2002
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-13033030/
关键词：
小胞体ミトコンドリアトポロジー膜透過受容体膜タンパク質シグナル配列前駆体膜輸送

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项目成果

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ミトコンドリアには外膜・内膜それぞれにタンパク質膜透過装置すなわち「tom(translocase of outer membrane)-複合体」および「Tim(Translocase of inner membrane)-複合体」が存在する。本研究はミトコンドリアへのタンパク質輸入に関わる各複合体因子の構造を明らかにし、さらに内膜・外膜のタンパク質輸入装置の構造を解明し、ミトコンドリアへのタンパク質輸入というダイナミックな生命現象を原始レベルで解明することを目的とする。本年度は、Tom-複合体のなかで透過チャネルを構成する中心成分であるTom40の解析を中心に進め以下の成果を得た。(1)大腸菌で発現し、封入体として高度に精製し、変性剤によって可溶化後、Ni-カラムに結合させその後カラム樹脂上で変性剤から界両活性剤に置き換えることによって立体構造を再生できた。(2)リポソームに再構成したTom40はカチオン選択性のチャネル活性を示し、この活性はミトコンドリア標的化プレ配列ペプチドで阻害されることがわかった。(3)電子顕微鏡では、内直径3nmのリング状構造が観察された。(4)マトリクスへ標的化される前駆体タンパク質を特異的に認識・結合することが、抗体を用いた共沈殿の実験や表面プラズモン共鳴の実験で明らかになった。また、この結合は静電的なものであることが判明した。(5)Tom40に結合した前駆体タンパク質はプロテアーゼに耐性となり、リング状構造の内側にまで進入して結合していることが示唆された。(6)Tom40単独および前駆体タンパク質(Su9-DHFR)との複合体の結晶化条件を検討中である。
期刊论文(12)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Miyazaki, B. et al.: "NHE6 protein possesses a signal peptide destined for endoplasmic reticulum membrane and localizes in secretory organelles of the cell"J. Biol. Chem.. 276. 49221-49227 (2001)
Miyazaki, B. 等人：“NHE6 蛋白拥有一个发往内质网膜的信号肽，并定位于细胞的分泌细胞器中”J.
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Sakaguchi, M.: "Autonomous and Heteronomous Positioning of Transmembrane Segments in Multispanning Membrane Protein"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 296. 1-4 (2002)
Sakaguchi, M.：“多跨膜蛋白中跨膜片段的自主和异质定位”Biochem.Biophys.Res.Commun.. 296. 1-4 (2002)
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Kanki, T. et al.: "The tenth membrane region of band 3 is initially exposed to the luminal side of the endoplasmic reticulum and then integrated into a partially folded band 3 intermediate"Biochemistry. 41. 13973-13981 (2002)
Kanki, T. 等人：“带 3 的第十个膜区域最初暴露于内质网的腔侧，然后整合到部分折叠的带 3 中间体中”生物化学。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
Hone, C. et al.: "Characterization of the signal that directs the C-tail anchored proteins to the mammalian mitochondrial outer membrane"Mol. Biol. Cell. 13(in press). (2002)
Hone, C. 等人：“将 C 尾锚定蛋白导向哺乳动物线粒体外膜的信号特征”Mol。
DOI： --
发表时间：
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 6 条
    Functional analysis of translocon factors involved in the topogenesis of membrane proteins
    • 批准号：
      20K06510
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
    • 资助金额：
      $2.75万
    • 财政年份：
      2020
    • 负责人：
      阪口 雅郎
    • 依托单位：
      University of Hyogo
    膜タンパク質の生合成と構造形成プロセス
    • 批准号：
      18031031
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $7.81万
    • 财政年份：
      2006
    • 负责人：
      阪口 雅郎
    • 依托单位：
      University of Hyogo
    ミトコンドリア膜蛋白質の選別輸送と構造変換機構
    • 批准号：
      17048027
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $4.03万
    • 财政年份：
      2005
    • 负责人：
      阪口 雅郎
    • 依托单位：
      University of Hyogo
    膜タンパク質のオルガネラ標的化とトポロジー構築
    • 批准号：
      17028049
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $5.12万
    • 财政年份：
      2005
    • 负责人：
      阪口 雅郎
    • 依托单位：
      University of Hyogo
    海外基金