膜タンパク質のオルガネラ標的化とトポロジー構築

膜蛋白的细胞器靶向和拓扑结构构建

• 批准号: 17028049
• 负责人: 阪口 雅郎
• 金额: $ 5.12万
• 依托单位: University of Hyogo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17028049/
• 关键词: 生体膜; オルガネラ; シグナル配列; トポロジー「; 膜蛋白質; 生合成; トポロジー

【1】小胞体トランスロコンは予想外に幅広いアミノ酸配列を識別して膜貫通配列の配向を決定する:シグナル配列が膜に進入する時点で配向を決定するポリペプチド鎖上の正荷電アミノ酸残基が,疎水性配列から25残基離れた場所からも作用できること,正荷電残基はリボソームから外に出て作用していることを明らかにした。トランスロコンは予想以上に広い範囲のアミノ酸配列を識別していると考えられる。【2】小胞体トランスロコンは2本のポリペプチド鎖を許容できる:ストレプトアビジンに結合するベプチドタグ(SBP-tag)を使って,ポリペプチド鎖のトランスロコン内での移動を停止・再開できる実験系を確立した。これを用いて,トランスロコンには2本のシグナル配列と2本の膜透過途上の親水性ポリペブチド鎖を収容できることを明らかにした。収容されたポリベプチド鎖は,ストレプトアビジンから解離後速やかに膜の反対側に移行し,膜内で正常に配向を決定できた。トランスロコンはきわめて柔軟で,多数のポリペブチド鎖を収容できると結論した。【3】シグナル配列がポリベプチド鎖の膜透過を駆動する:力学的アンフォールディング特性が詳細に判明しているタイチン127ドメイン(及びその変異体)をアミノ末端に付加したモデル蛋白質を用いて,N-末端ドメイン膜透過駆動作用を解析した。シグナル配列のトランスロコン内への進入がN-末端の膜透過を引き起こす主要な駆動要因であることが明らかになった。シグナル配列が,ポリベプチド鎖の小胞体への標的化や配向決定にかかわると同時に,駆動の原動力になっていることを示した。

【 1 】 small cell body ト ラ ン ス ロ コ ン は to think outside of に hiroo い ア ミ ノ acid with column を recognition し て transmembrane with column の to を decided す る : シ グ ナ ル go が membrane into に す る point で match to を decided す る ポ リ ペ プ チ ド locked の is charged ア ミ ノ acid residues が, 疎 water-based match column か ら 25 residues from れ た places か ら も role で き る こ と, are charged the residual Outside the base は リ ボ ソ ー ム か ら に derive て し て い る こ と を Ming ら か に し た. ト ラ ン ス ロ コ ン は to think above に hiroo い van 囲 の ア ミ ノ acid with column を recognition し て い る と exam え ら れ る. 【 2 】 small cell body ト ラ ン ス ロ コ ン は 2 this の ポ リ ペ プ チ ド lock を allowable で き る : ス ト レ プ ト ア ビ ジ ン に combining す る ベ プ チ ド タ グ (SBP - tag) を make っ て, ポ リ ペ プ チ ド lock の ト ラ ン ス ロ コ ン within で の mobile を stop, open another で き る be を 験 department established し た. こ れ を with い て, ト ラ ン ス ロ コ ン に は 2 this の シ グ ナ ル go と 2 this の membrane through way の hydrophilic ポ リ ペ ブ チ ド lock を 収 let で き る こ と を Ming ら か に し た. 収 let さ れ た ポ リ ベ プ チ ド lock は, ス ト レ プ ト ア ビ ジ ン か ら after dissociation rate や か に membrane の reverse side に seaborne migration し, membrane で normal に match to を decision within で き た. ト ラ ン ス ロ コ ン は き わ め て soft で, most の ポ リ ペ ブ チ ド lock を 収 let で き る と conclusion し た. [3] シ グ ナ ル go が ポ リ ベ プ チ ド lock の membrane through を 駆 dynamic す る : mechanics ア ン フ ォ ー ル デ ィ ン グ features detailed に が.at し て い る タ イ チ ン ド 127 メ イ ン (and び そ の - variants) を ア ミ ノ end に plus し た モ デ ル protein を い て, N - terminal ド メ イ ン membrane through 駆 action を parsing し た. シ グ ナ ル go の ト ラ ン ス ロ コ ン within へ の into が N - terminal の membrane through を lead き up こ す main な 駆 move by で あ る こ と が Ming ら か に な っ た. シ グ ナ ル go が, ポ リ ベ プ チ ド lock の small cell body へ の mark the や match to decide に か か わ る と に at the same time, the dynamic の 駆 impulsion に な っ て い る こ と を shown し た.

项目成果

Translocation of a long amino-terminal domain through ER membrane mediated by following signal-anchor sequence

由以下信号锚定序列介导长氨基末端结构域通过内质网膜的易位

• 发表时间: 2005
• 期刊: EMBO J. 24
• 作者: Kida;Y. et al.
• 通讯作者: Y. et al.

Topogenic properties of transmembrane segments of Arabidopsis thaliana NHX1 reveal a common topology model of the Na+/H+ exchanger family.

• DOI: 10.1093/jb/mvi132
• 发表时间: 2005-10
• 期刊: Journal of biochemistry
• 影响因子: 2.7
• 作者: Yoko Sato;M. Sakaguchi

Function of positive charges following signal-anchor sequences during translocation of the N-terminal domain

• DOI: 10.1074/jbc.m506613200
• 发表时间: 2006-01-13
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Kida, Y;Morimoto, F;Sakaguchi, M
• 通讯作者: Sakaguchi, M

Manipulation of membrane protein topology on the endoplasmic reticulum by a specific ligand in living cells

通过活细胞中的特定配体操纵内质网上的膜蛋白拓扑

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Biochem. 138
• 作者: Ikeda;M. et al.
• 通讯作者: M. et al.

Vestibular hair bundles control pH with (Na+, K+)/H+ exchangers NHE6 and NHE9

• DOI: 10.1523/jneurosci.2990-06.2006
• 发表时间: 2006-09-27
• 期刊: JOURNAL OF NEUROSCIENCE
• 影响因子: 5.3
• 作者: Hill, Jennifer K.;Brett, Christopher L.;Gillespie, Peter G.
• 通讯作者: Gillespie, Peter G.