权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

患者ゲノム情報と網羅的全ゲノム編集技術を駆使したTP53変異白血病の病態解明

利用患者基因组信息和综合全基因组编辑技术阐明TP53突变白血病的病理学

基本信息

批准号：
19J01412
负责人：
仙波雄一郎
金额：
$ 2.58万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2019
资助国家：
日本
起止时间：
2019-04-25 至 2022-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19J01412/
关键词：
急性骨髄性白血病 CRISPRスクリーニング

项目摘要

TP53はゲノム安定性、細胞周期、細胞老化、アポトーシス等の多岐に渡る細胞機能に関与し、細胞種毎にその機能的役割は異なる。我々は、TP53がAML細胞でも細胞維持に重要な機能を果たしており、TP53を欠失したAMLではその機能欠損のために特異的遺伝子群に生存を依存していると仮説を立てた。この仮説を証明すべく、昨年度、その欠損がTP53変異細胞特異的にsynthetic lethal (合成致死) に働く遺伝子を、全ゲノムCRISPR/Cas9スクリーニング用いて同定した。その中からTp53野生型AMLでのみenrichし、Tp53欠失AMLでdropoutした遺伝子としてXpo7に注目した。Tp53野生型および変異型マウス白血病細胞株にXpo7を標的としたsgRNAを導入し、crimson蛍光タンパク質で標識したXpo7欠失細胞株を樹立した。Xpo7野生型および欠失細胞を1:1で培養し、継時的にcrimson陽性細胞割合を測定した結果、Tp53欠失細胞でのみ、Xpo7欠失により細胞増殖が抑制された。さらに、実臨床においてTP53変異が治療関連白血病に多く認められることから、ダウノルビシン、シタラビン存在下で、Tp53野生型および欠失白血病細胞を競合培養し、継時的にTp53変異割合を評価した。Xpo7野生型細胞では、化学療法存在化でTp53欠失細胞割合が有意に増加したが、Xpo7欠失下ではTp53欠失による増殖優位性は認められなかった。これらの結果は、免疫不全マウスへの移植モデルを用いたin vivoでの実験でも確認された。以上の結果から、Xpo7を標的としたTP53変異白血病に対する新たな治療法の開発につながることが期待される。

The cell stability, cell cycle, cell aging, cell cycle, cell We, the TP53 AML cell cycle, and the TP53 cell have an important mechanism. The AML cell has the ability to survive, and the subgroup of the cell is dependent on survival. In the past year, there was a shortage of synthetic lethal (synthetic lethality) of TP53 cells in the last year, and all of them were found in the same way as CRISPR/Cas9. In China, Tp53 wild type AML lost enrich, and Tp53 lost AML, dropout, AML, Xpo7, attention. Tp53 wild type leukemic cell line "Xpo7" cell line "sgRNA" entry, crimson "light" cell line "Xpo7 missing" cell line "cell line". The results of 1:1 cell culture, crimson cleavage assay, Tp53 cell culture and Xpo7 cell colony inhibition assay of Xpo7 wild type yeast were detected. There are some problems in the treatment of leukemia, such as leukemia, TP53, leukemia, leukemia, leukemia. Xpo7 wild type cell cleavage, chemical cleavage of Tp53 deficiency cell cleavage, Xpo7 deficiency, Tp53 deficiency, colonization, histomorphology, histomorphology, histomorphology. The results of this study showed that the immune deficiency syndrome (in vivo) was confirmed by the transplant procedure (transplantation). According to the results of the above results, we are looking forward to the new treatment of leukemia after Xpo7 treatment.