患者ゲノム情報と網羅的全ゲノム編集技術を駆使したTP53変異白血病の病態解明

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TP53はゲノム安定性、細胞周期、細胞老化、アポトーシス等の多岐に渡る細胞機能に関与し、細胞種毎にその機能的役割は異なる。我々は、TP53がAML細胞でも細 胞維持に重要な機能を果たしており、TP53を欠失したAMLではその機能欠損のために特異的遺伝子群に生存を依存していると仮説を立てた。この仮説を証明すべ く、昨年度、その欠損がTP53変異細胞特異的にsynthetic lethal (合成致死) に働く遺伝子を、全ゲノムCRISPR/Cas9スクリーニング用いて同定した。その中からTp53野生型AMLでのみenrichし、Tp53欠失AMLでdropoutした遺伝子としてXpo7に注目した。Tp53野生型および変異型マウス白血病細胞株にXpo7を標的としたsgRNAを導入し、crimson蛍光タンパク質で標識したXpo7欠失細胞株を樹立した。Xpo7野生型および欠失細胞を1:1で培養し、継時的にcrimson陽性細胞割合を測定した結果、Tp53欠失細胞でのみ、Xpo7欠失により細胞増殖が抑制された。さらに、実臨床においてTP53変異が治療関連白血病に多く認められることから、ダウノルビシン、シタラビン存在下で、Tp53野生型および欠失白血病細胞を競合培養し、継時的にTp53変異割合を評価した。Xpo7野生型細胞では、化学療法存在化でTp53欠失細胞割合が有意に増加したが、Xpo7欠失下ではTp53欠失による増殖優位性は認められなかった。これらの結果は、免疫不全マウスへの移植モデルを用いたin vivoでの実験でも確認された。以上の結果から、Xpo7を標的としたTP53変異白血病に対する新たな治療法の開発につながることが期待される。